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CAtrlier等对ELISA和其他血清学方法诊断弓形 虫病进行评价,认为ELISA法是检测弓形虫抗体的一种可重复的 方法,易自动化和标准化[5J5。与染色试验(趼)符合率高,且 敏感性强。 * * 张伟伟 2012.5.24 弓形虫病:由刚第弓形虫(Toxoplasma gondii)引起的一种人畜共患病 弓形虫:又称弓形体,属原生动物门、孢子虫纲,是一种专性细胞内寄生虫。可寄生于除红细胞外的所有有核细胞内 流行性:2006年北京地区犬猫弓形虫病进行血清学凋查,发现犬弓形虫IgG抗体血清阳性率13.21 %,猫弓形虫IgG抗体血清阳性率14.06 %(于咏兰,中国兽医杂志,2006) 病原 弓形虫发育过程经过5个阶段:滋养体、包囊、裂殖体、配子体和卵囊 检测: 病原学检查:不同发育阶段的虫体。 血清学试验:IgM、IgG 病原检测: 涂片染色法、免疫酶或荧光染色法。 分子生物学方法 图片染色法: 取患病动物血液、骨髓或脑脊液、胸腹水、痰液、支气管肺泡灌洗液、眼房水、羊水等作涂片,或淋巴结、肌肉、肝、胎盘等活组织切片,作瑞氏或姬氏染色镜检可找到滋养体或包囊,但阳性率不高。 免疫酶或荧光染色法 PCR技术: 传统PCR 巢式PCR 实时荧光定量PCR 血清学检查: IgM:现较早(感染后第7—8天),持续数周至数月,偶有数年者 IgG: IgG是体液免疫应答产生的主要抗体,血清中含量最高,持续时间最长的抗体。 Michael R. Lappin , Veterinary Immunology and Immunopathology( 1996) 检测方法: 染色试验(DT) 间接血凝试验(IHA) 间接免疫荧光抗体试验(IFA) 酶联免疫吸附试验(ELISA) 酶联免疫吸附试验(ELISA) 症状: 先天性弓形虫病:胎盘感染 获得性弓形虫病:免疫力受损时,常为全身性感染。 获得性弓形虫病 人和动物都可以发生,表现为多器官受损,临床症状复杂严重。 (1) 淋巴结 ? 急性患者淋巴结肿大,变硬,有橡皮样感,伴有长时间低热,疲倦,肌肉不适等。 (2) 脑炎、脑膜炎、癫痫和精神异常等中枢神经系统病症 (3) 眼病,以视网膜脉络膜炎为多见,也出现斜视、虹膜睫状体炎、色素膜炎等,眼内出现浆液性或脓性分泌物,影响视力。 (4) 其它,心肌炎、心包炎。肝、脾等疾病。 防治原则: 加强卫生宣教:不要与猫亲密接触。 加强肉类检疫、改变不科学的食肉习惯: 不吃生或半生的肉类。 药物治疗: 乙胺嘧啶、磺胺类对增殖期弓形虫有抑制生长的作用。常用制剂为复方新诺明,亦可与乙胺嘧啶联合应用提高疗效, 孕妇禁用乙胺嘧啶,换用螺旋霉素。 * ,呈全球性分布,特别集中于温暖、潮湿和低海拔区域,估计全世界有1/3的人感染此病原体,由于它主要引 起机会性感染,孕妇和免疫功能缺陷者感染严重。 * 滋养体:呈弓形、月芽或香蕉形 一端较尖,一端钝圆;一边扁平,另一边较膨隆 长4~7μm,宽2~4μm ,游离虫体能螺旋式转动 假包囊:被宿主细胞膜包绕的虫体集合体称假包囊(pseudocyst) 假包囊内的滋养体,又称速殖子(tachyzoite) 增殖至一定数目时,胞膜破裂,速殖子释出,随血流至其它细胞内继续繁殖 包囊:圆形或椭圆形 直径5μm-100μm 有一层弹性坚韧囊壁 囊内滋养体称缓殖子(bradyzoite) 卵囊:为圆形或椭圆形 大小为10~12μm 两层光滑透明的囊壁,内充满均匀小颗粒。成熟卵囊含2个孢子囊,每个孢子囊含4个新月形子孢子 猫等孢球虫和犬等孢球虫在猫的粪便中最常见,前者的卵囊最大,可达42×31μm,后者卵囊小,为24×23μm 刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)为专性细胞内寄生原虫,可感染人和多种动物,引 起人畜共患寄生虫病。经口感染是弓形虫的主要自然感染途径,感染后在肠道部位侵入黏 膜上皮,在肠黏膜上皮细胞内大量繁殖,随循环系统播散至全身致病 * 弓形虫经口感染小鼠后2 d,小肠组织出现大量速殖子;同时肺和心内有少量速殖子;4 d 在脾、6 d在肾和肝脏发现虫体;速殖子在上述组织内增殖,并形成假包囊,脑内未发现 虫体。 * * 动物接种分离法或细胞培养法查找滋养体,是目前常用的病原查诊方法。 动物接种 小鼠均为OF1系3周龄雌鼠;取羊水标本以 2000 r/rain离心5 rain,弃上清.沉淀以适量生理盐水溶解后经腹 腔接种小鼠,每组3只;所用羊水标本量平均为11.8±3.0 ml/组 细胞培养以分离自白血病患嚣的单核细胞系THP.1作为 宿主细胞.改良RPM1 1640培养基每周

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