miR-34b在儿童急性白血病中的表达.pdfVIP

第32卷第 4期 广 东 医 学 院 学 报 Vb1．32 No．4 526 2014年8月 J0URNALOFGUANGDONGMEDICALCOLLEGE Aug．2014 miR．34b在儿童急性 白血病 中的表达 周君纯 ，郑 丽 ，谭碧玉 (1．广东省湛江市第二人民医院血液室，广东湛江 524003；2．中山大学 附属第六医院检验科，广东广州 510655) 摘 要：目的 了解儿童急性白血病中miR-34b的表达。方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应(RQ．PCR)检测儿童 初诊急性白血病 (AL)患AL35例[其中急性淋巴细胞性白血病 (ALL)25例、急性髓系白血病(AML)10例】和非恶性血液病患 JL2o例(对照组)的骨髓标本中miR．34b的表达水平 。结果 AL组 、ALL组和AML组中的miR．34b相对表达量均明显低于 对照组，差异有统计学意义(尸l0．01)。结论 miR-34b可能作为新的抑癌基因参与儿童初诊AL、ALL和AML的形成。 关键词 ：儿童急性白血病；miR-34b；荧光定量聚合酶链反应 中图分类号：R551．2 文献标识码：B 文章编号：1005．4057(2014)04—0526—02 DoI：10．39698．issn．1005—4057．2014．04．045 白血病是一类造血干细胞恶性克隆性疾病 ，严重威胁儿 表1 扩增合成cDNA的miRNA序列 童的健康和生命 。研究发现 J【。J，miR．34b在结直肠癌 、胃 基因名称 基因序列 癌、胰腺癌、乳腺癌等多种恶性肿瘤中表达异常，而其是否 U6snRNA GTGCTCGCTTCGGCAGCACATATACTAAAA TTGGAACGA1ACAGAGAAGATTAGCATGGC 也在 白血病的发生发展中发挥重要的调控作用 ，本文对此进 CCCTGCGCAAGGATGACACGCAAATTCGTG 行了初步研究，通过实时荧光定量聚合酶链反应 (RQ．PCR)检 AAGCGTTCCATATTTT 测了miR．34b在儿童急性 白血病(AL)中的表达水平 ，现将结 H8a—miR一34b UAGGCAGUGUCAUUAGCUGAUUG 果报道如下。 1 ，10×逆转录酶缓冲液1．5 ，RNA酶抑制剂 0．19 ， 1 资料和方法 无核酸酶纯水4．16gL，引物3gL，RNA模板5gL，混匀后放 1．1 一般资料 人PCR仪进行扩增。扩增产物放人4℃冰箱冻存备用。 骨髓标本取 自2010年 12月至2013年 1月在湛江市第二 1．2．4 实时荧光定量PCR检测 定量PCR检测各组miR一34b的 人民医院初诊为AL的患JL35例 ，其中急性淋巴细胞性白血病 表达水平 ，具体操作参照试剂盒说 明书。20 L反应体系如 (ALL)25例 ，急性髓系 白血病(AML)IO例。同时收集非恶性 下 ：TaqManmiRNA分析试剂 (20X)1．00uL，RT反应产物 血液病患)L20例作为对照组。疾病诊断及疗效标准均按照急 1．33 ，TaqMan2×通用PCR反应混合液10．o0 ，无核酸 性 白血病的分型诊断标准和 《血液病诊断及疗效标准》(第 酶纯水7．67 ，混合后，将反应管密封 ，短暂离心后放入定 3版)进行判定_4J。