增效醚对棉铃虫的毒理学的研究.pdfVIP

增效醚对棉铃虫的毒理学研究 许雄山韩召车任晓霞王荫长 南京永、世大学农业部病虫船删与治理重点jl‘破实聆事，南京210095) (舱 滴处 x10 xI x 10一mc —7Ⅲ01／L，4．46O’7m01几和1．42J1／L：PBO对酯酶的抑制为不可逆抑制。因此，PBO的增效机理在抑 制代谢酶系的水平上并不是专一的；对于筛铃虫而吾，PB0具有明显的杀虫活性，用其进行增效买验判断MFO 制作用的专一性。 关键词：PBO棉铃虫(舴』，fDyor阳日肋』占e，d)毒理学 增效醚，化学名称3，4一距甲一氧基一6一止内基苄基正r基一二缩乙醇醚，简称PB或 参与害虫抗药性形成，可以诡是研究抗药性生理生化机理的常用工具之一。然而，我们在研究 它对棉铃虫具肯～定的杀虫活性。经检索仪有Gunning提及过PBO可以结合棉铃虫’j抗性寿爿犬 的酯酶，除此以外没有笑rI)B0对棉铃虫毒理学机制的任何报道。为此，我们作了较为全面的 驯究，这对j‘重新确立它庄害虫抗曲性研究中的地位和提高研究结果的可靠性具有重耍的意 义。 1．材料与方法 1．1．供试昆虫： 】995年10目采口新船刚拉尔地区的棉铃虫滞育蛹，置于10℃r2个月解除滞育，然后住 暗)。成虫饲嗖508／I，的糖水。幼虫在3龄以前群体婀养，3龄以后分管单头饲养。在整个饲 养过稃中未接触任佃曲剂。 1．2．试剂： —NA)，分析纯，上海试剂厂：十一烷丛硫酸钠(SDS)，分析纯，上海伯奥牛物科技公司； 曰蓝B盐，分析纯，1．海化。’≯试制采购供应站。还原喇谷胱甘肽(GSH)．分析纯．s{gma公 纯，北京化1厂：还原1q辅酶IJ，含世人丁98％，Simma公司：三氯甲炕、氢氧化钠 (()．5mot／L)…Jb,酸(1IIl01『)．均为分析纯，南京化’≯试剂厂。 】．3．毒力测定方法： 3龄幼虫，以不锈钢毛细箭点滴器(0．05l从)^滴鲋液f试虫的胸部背板l，设丙酬为对 }!}【。,t8h后检商，E虫数，¨{机率值分析法计算毒力同F 1线和致死中量LD。死亡标准为：川锐 器角刺激虫体任何部忙．无明湿[f。E反应苦为死亡。 1．4．酶活测定方法： Chihchen 参照E1rHarl(196fj、V÷．tnds【)creli苫(1962)、C1ark等(198一t)希j8har]g 活性和I。 1．5．抑制中量【1。)的测定方法： n，抑 对j乙酰胴城酯酶，抑制体积为ImL(0．4rid哦液，0．6ml。抑制剂)，抑制时间为20mi 20mi 制温度为370C，反应体积为1．8mI。，反J、tn后也即按上述活力测定方法进行比色，以这时 的0巩，。值为酶活力计算酶活抑制率。 为20min，抑制温度为300C，反应体积为0 89 5mLO．1日01II 最I|亓加lr pit7．0的磷酸缓冲液补允刮2．5mL后进行比色，以这时的OD6∞值为酶活 力计算酶活抑制率。 蔫●广． 对T-多功能氧化熵，抑制体积为lm[．(0．SmL酶液、0．2mk抑制剂)，抑制时间为15m]n， 氯甲烷进行萃取，取圳．一二氯甲烷与3mI。Na0H混合，再取NaOH层测定0D。值，以这时的oDm 值为酶牺九计算酶活Ⅲ{Ⅻ率。 分别以抑制剂抑制终浓度的对数债jI酶活抑制率的概率值求樽相应的l。 1．6．PB0对酯酶抑制类型的鉴定方法： 参_I{{{许根俊i19：_{8j的方法进行测定。在这里是测定全酯酶的活力，酶液配制按CarbE的 方法进行。酶液的抑制：温度30C，时间20min