静电场对成纤维细胞生长的调控的研究.pdfVIP

182 现代静电科学技术研究 *D静电生物效应* 静电场对成纤维细胞生长的调控研究+ 江键崔黎丽宋诚荣方 影 (第二军医大学，上海，200433) 4、 时后，用流式细胞术研究PⅡ甚驻极体对313细胞周期的影响。实验结果指出：1)负极性 准备期(岛期)内的细胞数减少，而DNA合成期(s期)中的细胞数增加。即负极性驻极体 驻极体在促进3T3细胞生长的同时对变异细胞有促进其凋亡的作用。即负极性驻极休对 成纤维细胞的生长有双向调节作用。 关键词驻极体细胞生长周期流式细胞术成纤维细胞 0 引言 聚四氟乙烯(Teflon V1WE)是具有生物相容性的生物驻极体材料，它产生的静电场和微 电流作用于人体或动物，不仅具有促进骨折愈合、促进移植肌功能恢复和促进创面愈合的功 能，而且还具有改善微循环、改善血液流变学指标和抗血栓的作用【1q】。美国布郎大学和 贝尔实验室的科学家们发现：正极性驻极体作基片能促进胚胎期神经细胞恶性肿瘤的增 生【4J。细胞周期的调控与个体发育、分化、生长、再生、衰老以及细胞的癌变都有密切关系。 因此，细胞周期调控近年来己成为分子生物学和生物医学工程学研究的热点问题之一。作 者采用TeflonPTFE驻极体作用于成纤维细胞，通过流式细胞术(Flow 究驻极体对正常细胞生长周期的影响及其调控机理，为探索与细胞周期和细胞凋亡有关疾 病的物理治疗开拓一条途径。 1材料及方法 1．1驻极体材料 驻极体材料选用美国杜邦公司生产的25脚厚的聚四氟乙烯(TenonPTFE)，用电晕充 电系统对驻极体实施充电，制成一300 V驻极体，其表面电位用补偿法测量(1soprobe E1ectrostatic Voltmeter，type244，USA)，驻极体常规消毒后备用。 1．2细胞及培养 1．2．1细胞株小鼠胚胎成纤维细胞(3T3--Swiss 常培养的细胞为对照组，驻极体作用的细胞为实验组。 ·国家自然科学基金资助项目(No 江键等：静电场对成纤维细胞生长的调控研究 183 生小牛血清的RPMll640培养基中，在37*(7、5％002条件下培养2h后，把经过消毒的带有 不同电位的驻极体放人培养瓶内，充电面作用于细胞，驻极体分别作用3T3细胞24、48和 72 h后，收集细胞。 1．2．3FCM检测取1×106／mL，100L上述细胞用冷PBS洗两次，加50pL台0．1％ 胞内总DNA，在CoulterEPICSESP流式细胞仪上进行DNA含量分析。测量速率为50～ 胞。 2结果 2．1驻极体对3T3细胞生长周期的影响 表1、表2分别给出了一300V驻极体作用于正常3T3细胞不丽时同后，驻极体对细胞 规律基本相同。负极性驻极体具有促进313细胞生长的作用。 表1驻极体作用于3T3细胞24h对细胞生长周期的影晌 *P0，05，**R001与对照组比较 衰2驻极体作用于3T3细胞不同时何对3T3细胞生长周期的影响 实验组与对照组比较 2．2负极性驻极体对3T3细胞凋亡的作用影响 一300伏驻极体作用于3T3细胞24h后，不仅具有促进正常细胞生长的作用，同时对变 异的细胞有促进其凋亡的作用(图1)，圉中显示：驻极体组细胞的凋亡峰较对照组明显增 加，且凋亡细胞的出现来源于Q／M期，而不是s期。这种作用效果与作用时间无统计意义 上的相关性。这充分说聪，负极性驻极体对3T3细胞的生长有双向调节作用。 3讨论 随着细胞生物学和分子生物学研究的深入，目前己从机体的细胞群体、增殖分化、分布 消亡规律以及它们对生理和理化因子的调节反应等方面定量研究细胞的动力学规律。细胞 周期的调控是十分复杂的，除了受周期蛋白等内源困子调控外，还受到许多外源信号的调 控，关键是通过激活生长因子受体，起动基因表达来控制细胞的增殖。本实验的研究结果显 示：负极性驻极体作用于3T3细胞24小时后，G1和G2期的DNA含量比对照组分别下降约 184