荧光素-牛血红蛋白的化学发光反应研究和应用.pdfVIP

第24卷增刊 分析试验室 Vol.24.Suppl. 2005年 10月 ChineseJournalofAnalysisLaboratory 2005一10 荧光素一牛血红蛋白的化学发光反应研究及应用 莫小曼，黄春保，李云香，朱立红 (黄冈师范学院化学系，黄州438000) 摘 .要:近年来，陆续有蛋白质测定方法的报道[[1-31，这些方法在临床医学、食品 检测和生命科学研究中具有一定的应用价值。 本文采用反相流动注射方法，研究了碱性介质中次氛酸钠氧化荧光素一牛 血红蛋白标记物的化学发光行为、反应条件和阳离子表面活性剂的增敏作用。 通过条件选择及优化，提出了反相流动注射化学发光测定牛血红蛋白的新方法。 关键词:荧光素;牛血红蛋白;化学发光;反相流动注射 1 实验方法 果表明，NaC10溶液的声在9.0一10.0范围内，体 采用反相流动注射法。取0.4mL浓度为1.0 系的发光强度最大且稳定。酸度太高或太低，体系 x10-4mol/L荧光素溶液于25mL容量瓶中，加人 的化学发光强度都会显著降低。 0.4mL浓度为50mg/mL牛血红蛋白，混均后稀释 试验了NaC10溶液的浓度对体系化学发光强 至刻度。荧光素一牛血红蛋白混合液、澳化十六烷 度的影响。结果表明，当NaC10的浓度大于8.6x 基三甲胺(CTMAB)通过蠕动泵抽提、混合;NaC10 10-2=UL时，体系的发光强度达到最大且稳定。 溶液通过旋转六通阀注人，每次注射体积为100 3 样品的测定 汕。试液在流动过程中混合，并立即流进发光仪 分别取适量的市售纯牛奶样品(生产厂家:青 检测化学发光强度。 岛雀巢有限公司制造，生产日期，采用 2 结果与讨论 标准加人法进行了回收率测定，测得产品的回收率 试验表明，在碱性条件(pH二9.5)和CTMAB 为104%一110%. 存在时，以NaC10溶液作氧化剂，荧光素和牛血红 蛋白均能被氧化而产生化学发光，但发光能力较 参考文献 弱;而荧光素一牛血红蛋白标记物却具有很强的氧 [1〕张明翠，江乐余，李 玲等.分析化学，2004,32(3); 化发光能力。动力学过程表明荧光素一牛血红蛋白 342 -C10一体系是快速发光体系。 [2]宋功武 方光荣，刘立明.分析科学学报，2003,19 试验了8.0x10-7一8.Ox10-6mol/L浓度范围 (2):130 内荧光素对体系化学发光强度的影响。试验表明， [3〕李 听，杨 屹，张新祥.分析科学学报，2003,19 (5):401 当荧光素的浓度大于或等于3.2x10-6mol/L时， 体系的化学发光强度最大且信号的重现性较好。 hemoglobinCLsystemanditsap- 试验了阳离子型、阴离子型和非离子型表面活 M口Xia-o刀赵口乙，刀UANGChun-6ao，LIYunr 性剂对体系化学发光强度的影响。其中C1INIAB的 ZHULi,hong(DeprotmentofChemistry, 增敏效果最佳，能使体系的发光强度增强40倍。