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我国几种果树上的植原体检测研究 朱水芳1刘 健2罗 飞3张成良z杨立2 (1农业部檀物检疫实验所，北京100029，2中国农业大学植物 病理系，北业科学院林业研究所，北京100091) 植原体在长期应用营养繁殖的果树中危害普邋荷严重。目前国内外巳报道檀原体病害300多 种，果树檀原体病害40多种，其中在欧美发生的苹果丛枝病、软枝病、簇叶病，督萄黄化病，椰 子致死性黄化，樱桃X病是几种局部分布的重要植原体病害，在我孱尚束见报道。近年来，一些 果树生产比较先进的国家5，对果树檀原体病害进行了调查鍪定；建立了有效检测技术。我国对于 果树病毒和植原体病害的研究起步较晚，随着病害发生日趋严重和由国外引入果树苗木的增加，必 须给予重视。为此，作者对北京、河北地区发生的桃黄化、桃红许、樱桃黄化卷叶、苹果黄化、李 黄化卷叶和葡萄黄化症状的样本进行了初步检测。 最近几年在北京郊区老果园桃黄化大面积发生、危害严重的病害。主要症状为叶片黄化、轻 微丛枝，2～3年后枝干顶端干枯至全株死亡。 桃红叶病是国内近年来普遍发生的新病害，春季新梢叶片呈现特异性红化症，随气温上升逐 渐转绿，重症的红化叶枯萎，导致枝枯。 樱桃黄他卷升、李黄化卷叶以及苹果黄化几种瘸害最近两三年在北京郊区果园发生。主要症 状为叶片羹化，樱桃和李予的病叶还表现皱缩卷叶，严重时叶片枯萎，檀株明显矮化，产量损失 严重，并}f起全株死亡。 。 葡萄黄化最近在河北长城葡萄酒公司葡萄基地的一个引进品种上大面积严重发生，发病率几 乎100％，主要症状为叶片变小、黄化。 国外曾报道桃黄化、葡萄黄化，可能是檀原体病害。为了明确这几种病害的病原，作者从新 为55C。经PCR扩增、1％琼脂糖凝胶电泳对上述6种材料检测，在桃黄化、葡萄黄化、桃红叶、 樱桃黄化卷叶症状样本中，都测到植原体的特征谱带(PCR产物为1．2kb)。其中桃黄化样品检出 到RFLP图谱，发现和已知植原体具有较大的相似性。对RFLP结果还有待于进一步研究分析及 与已知植原体的RFLP图谱进行比较，以确定其分类地位。 此外，作者还对桃黄化、苹果黄化、李黄化卷叶进行了超薄切片电镜观察。在桃黄化叶中脉 的韧皮部筛管细胞中观察到典型的植原体，大多数为球状、无细胞壁、有双层细胞膜。 以上结果表明桃黄化不仅具有典型的症状，电镜下也观察到典型的植原体，并经PCR方法全 部检测出植原体特征性谱带，可以认为此病与植原体密切相关。我们还嫁接桃黄化病枝到健康的 毛桃实生苗上，以进一步确证。 樱桃黄化卷叶、桃红叶、葡萄黄化PCR也检测出植原体的存在，未进行电镜观察。 284 苹果黄化和李黄化卷叶PCR未检测出植原体特征性谱带，电镜下也未观察到典型的植原体， 但不能排除浓度低和季节的影响；桃红叶曾发现病毒病原，对植原体的致病作用仍待进一步重复 研究。 对这几种病害的病因由于植原体在果树中浓度低，以及受季节影响，仅用超薄切片技术难以 诊断．我们采用灵敏的Nested--PCR，在桃黄化、桃红叶、樱桃黄化、葡萄黄化症状材料中都检 出了檀原体特异性的PCR产物，并且在桃黄化超薄切片中，检测到植原体，因此认为这些瘸害是 檀原体病害的可能性很大． 这几种病害在某些果园引起严重损失，但尚未见广泛分布的报道，建议给予高度重视。