勒马回注射剂RP-HPLC指纹图谱的研究.pdfVIP

4 药物分析杂志 小檗碱的含量规定不应低于3．6％。8个黄连样品中7个药材符合药典规定，其中以青海九龙医药连锁有限 公司出售的药材最好。 勒马回注射剂RP-HPLC指纹图谱研究+ 王斌1 冯旭2李珍2孙文基1 (1．西北大学生物医药重点实验室西安710069；2．万荣三九药业有限公司太原044200) 中药注射剂中未知非定量成分占有相当大比例，国家食品药品监督管理局拟首先在中药注射剂质量标 准中引入指纹图谱技术要求，指纹图谱以成为国际公认的控制中药和天然药物质量的有效的手段。为此， 研究者在勒马回化学成分和提取工艺研究的基础上，用RP．HPLC法尝试建立勒马回注射剂的指纹图谱。 l 仪器与试药 1．1仪器Beckman高效液相色谱仪(BeckmanGold 125高压泵，system 色谱工作站)。 提供。 2 色谱条件 色谱柱： Beckman lmL·min～；检测波长：254nm。 3供试品制备 精密吸取勒马回注射液5ml，置分液漏斗中加入水饱和正丁醇15mL，充分振摇，静置至溶液分层， 滤膜备用。 4方法学考察 h，1．5h，3h， 4．1稳定性试验取一新制备供试品溶液，连续测定7次，每次间隔1．5h供试品，供试品0 RSD为2．31％。 4．2精密度试验取一新制备供试品溶液，连续测定6次，对测定数据以相似度软件分析，均大于0．98， RSD为0．57％。 1．12％。 5 结果 将10批勒马回注射剂按供试品制备项下方法处理，进样209 过比较所测定和记录的色谱图，从中选定了9个共有峰作为构成指纹图谱的特征峰(图2)。 将色谱工作站数据分别导入西北大学、中南大学两种中药指纹图谱相似度计算软件，选定1，5两个 采用不同算法对每批样品进行整体相似度评价，结果见表1。 ‘国家药典委员会项目 196号 药典业发(2002)；g 23(增刊)，2003 5 maker l ●1^fl r●L_I●_■■■nn¨r J-●■日■■nI kkL} ：～自- —b毫喀 ～等毒； — 图1十批注射剂指纹图谱 图2 勒马回注射液指纹图谱特征 1 of10batch 2 characteristicSof Fig Fingerprints injection Fig Fingerprint peakinjection 6讨论 实验采用甲醇—0．5％醋酸恒流洗脱法，使勒马回注射剂中大部分黄酮类化合物得到了较好的分离，得 到较完整的HPLC色谱图。该法精密度和重现性较好，可用来评价和控制勒马回注射剂的内在质量。精密 度、稳定性、重现性考察时均采用计算相似度数值之间的相对标准偏差来考察，大大减少了使用计算色谱 峰面积或保留时问的相对标准偏差来进行方法学考察的工作量。由表1可以看出，同一实验数据，采用不 同软件，不同算法，其结果不同，因此亟待国家有关部门出台相关政策。但同时我们也不主张只规定一种 算法，可以先规定几种较为成熟的算法，通过一段时期的应用后再进行取舍。因为任何一种算法的优劣， 都需要大量数据的检验，而现有的算法都