2012微生物学二章--微生物营养与培养基.pptVIP

第二章：微生物营养和培养基 了解不同微生物需要什么营养物，怎样吸收，起什么作用，如何为其配餐。 营养物：必须得到的细胞结构 成分，必须得到的能量储存物质。 营养：把营养物从外界吸收至细胞内，复制出新细胞结构的过程。 1节：营养物及其功能 一、细胞化学组成 整个生物界大体相同，主要是C、H、O、N（占干重90-97%），C（约50%），此外为各种无机元素，由这些元素再组成化合物。其中C/N一般是5:1。 1、水分和无机元素 含水70-90%（鲜重），无机元素（3-10%干重）依次为P、S、K、Mg、 Ca、Fe、Zn、Mn等。 2、有机物 蛋白质 核酸 碳水化合物 类脂 维生素等 二、主要营养物及其功能 主要功能：提供合成原生质和代谢产物原料；产生合成反应及生命活动所需能量；调节新陈代谢。 （一）碳源物质 定义：凡能提供微生物营养所需碳元素的营养源。 功能：碳源、能源 微生物碳源谱： （二）氮源物质 定义：凡能提供微生物营养所需氮元素的营养源。 功能：氮源，一般不作能源。 微生物氮源谱： 氨基酸自养型和异养型生物 速效氮源和迟效氮源 生理碱性、酸性、中性盐 （三）能源 化学能：有机物-化能异养微生物 无机物 -化能自养微生物 光能 （四）生长因子 定义：一类对微生物正常代谢必不可少且又不能从简单的碳、氮源自行合成的所需极微量的有机物。 种类：维生素、AA、base、FA等。 作用：辅酶或酶活化 来源：酵母膏、玉米浆、麦芽汁等，复合维生素。 浓度： （五）无机盐 所需浓度在10-3-10-4M的元素为大量元素 所需浓度在10-6-10-8M为微量元素。 主要功能：构成菌体成分；酶活性基组成或维持酶活性；调节渗透压、pH、Eh；化能自养微生物能源等。 无机元素来源与功能： 一些无机元素加入盐： （六）水 存在状态：游离态（溶媒）和结合态（结构组成） 生理作用：组成成分；反应介质；物质运输媒体；热的良导体。 2节：微生物营养类型 依碳源不同： 异养型heterotrophs（不能以CO2为主要或唯一碳源。 自养型autotrophs（能以CO2为主要或唯一碳源。 依能源不同： 光能营养型phototrophs（光反应产能） 化能营养型chemotrophs （物质氧化产能） 这样可将微生物分成四种营养类型 （插入） 其中，化能异养型又据利用有机物特性，分成腐生和寄生。 营养类型划分不是绝对的，不同生活条件下，可相互转变。 3节：营养物吸收与代谢物分泌 营养物吸收至胞内被利用，代谢物分泌到胞外以免积累，这就是物质运输过程。 通透性与吸收是不同概念。 一般 大分子：先水解为小分子，再吸收。 脂溶性物质：易透过 离子化合物：弱快强慢（极性） 一、营养物吸收 1、单纯扩散 simple diffusion 依靠胞内外溶液浓度差，顺浓度梯度运输，不消耗代谢能，无特异性。水、二氧化碳、氧气、甘油、乙醇等。 2、促进扩散 facilitated diffusion 借助载体蛋白顺浓度梯度运输，不耗能，有特异性。载体蛋白（渗透酶）有底物特异性，是诱导产生的。硫酸根、磷酸根、糖（真核） 3、主动运输 active transport 吸收营养物的主要机制。 逆浓度梯度运输，耗能，需载体蛋白，有特异性。氨基酸、乳糖等糖类、钠、钙等无机离子。 亲和力改变←蛋白构象改变→耗能 上述3种方式中，被运输的溶质分子都不发生改变。 4、基团转位 group translocation 属主动运输，但溶质分子发生化学修饰-定向磷酸化。主要依赖磷酸烯醇式丙酮酸（PEP）和磷酸转移酶系统（PTS）。 PEP+ HPr=丙酮酸+P-HPr (EI) 糖+P-HPr=糖-P+HPr (EII) 膜对大多数磷酸化合物具有高度的不渗透性。葡萄糖、果糖、甘露糖、嘌呤、核苷、脂肪酸等。 二、代谢物分泌 微生物能分泌多种物质，如有机酸、糖类、胞外酶、荚膜多糖等，由此可知，分泌与吸收不是同一机制。 4节：培养基 medium 选用各种营养物质，经人工配制用来培养微生物的基质。 一、培养基类型 1、依来源不同：合成、天然、半合成。 2、依状态不同：固体、半固体、液体。 3、依功能不同：选择、鉴别 二、选择和配制培养基的原则和方法 （一）四个原则 1、目的明确 培养什么微生物，获得什么产物，用途 2、营养协调 恰当配比，尤其是C/N比（100/0.5-2） 3、物理化学条件适宜 pH，考虑区别，培养基调节能力。采用磷酸缓冲液或加入碳酸钙，流加酸、碱。 渗透压和水活度 aw : 等渗适宜。 aw表示在天然环境中，微生物可实际利用的自由水或游离水含量。微生物适宜生长的aw为0.6-0.998之间。 氧化还原电位Eh：好氧微生物+0.1v以上