人脑胶质瘤裸小鼠原位移植瘤病理学特征分析.pdfVIP

2009年“临床诊断和治疗新进展研究一暨“全国肿瘤病理诊断交流”研讨会 人脑胶质瘤裸小鼠原位移植瘤的病理学 特征分析 黄强“2张全斌2董军1李如军1费喜峰2宋武超1兰青1 L捅要J目的早先的人脑胶质瘤裸小鼠皮下移植瘤模型因其生长环境不在原位，不可能全 面复制亲本肿瘤的生物学特征。为之，本文建立人脑胶质瘤裸小鼠原位移植瘤模型蓝探讨其病理学 特征，旨在阐明在胶质瘤研究方面的实用价值。方法采用微孔钻颅，立体定向仪或组织块接种装置 将细胞系悬液、干细胞球、肿瘤组织块通过颅骨孔穿刺植入裸小鼠尾状核。待实验鼠出现恶病质症 状时处死，取包括移植瘤在内的全脑进行石蜡包埋切片，H-E、相关抗体免疫组织化学和免疫荧光染 色，在光学显微镜和共聚焦显微镜下观察移植瘤的病理学特征。结果移植瘤除了能反映出亲本肿瘤 侵袭性特性，还见到了胶质瘤干细胞参与肿瘤血管形成，与宿主细胞融合和拟寄生地(宿主)组织细 胞类形生长的肿瘤，即拟态肿瘤的组织细胞和分子病理特征。结论人脑胶瘤细胞和组织块，特别是 胶质瘤干细胞球进行免疫缺陷动物原位移植能较全面反映亲本肿瘤的基本病理学特征，肿瘤血管形 成、宿主细胞融合和拟态生长，对进一步研究胶质瘤发生发展新机制有重要价值。 关键词：胶质瘤／干细胞，原位移植瘤／病理，裸小鼠／人癌移植 作者单位：1苏州大学附属第二医院神绎外科暨脑肿瘤研究室 215004：2上海交通大学附属九龙医院神经外科215123 通讯作者：黄强，苏州市三香路1055号，苏州大学附二院神绎外 科暨脑肿瘤研究室，办公式电话051267784087： 基金项目：国家自然科学基30772241 173。 江苏省基金BK2007507，BK2008 序言 人脑胶质瘤免疫缺陷动物异种移植经历了将近40年的里程，如果说从最早的人脑胶质瘤细胞或 组织块的直接皮下移植发展剑近年的脑内原位接种，在体现肿瘤亲本性特征方面上了一个新的台阶 的话，那么不得不说新近发展起来的脑肿瘤干细胞裸小鼠尾状核接种，在研究肿瘤发生发展、侵袭 播散、血管形成和组织重塑等方面具有划时代意义，成了研究上述领域无法替代的实验模型。本课 题组从上个世纪八十年代建立了中国第一个人脑胶质瘤裸小鼠皮下移植瘤模型NHG-1以来…，同步经 历了上述过程，本文综合报告本课题组用肿瘤细胞悬液、组织块和肿瘤干细胞球在裸小鼠脑内致瘤 的亲本性、侵袋性、重塑性和拟态性方面所做的jI：作，其中拟态性是在本次会上第一次发表。 一、亲本性 取人肺腺癌脑转移的新鲜组织眩l或人脑多形性胶质母细胞瘤裸小鼠皮下移植瘤组织口1，剪成小 块，置入专用套管针，通过事先钻好的颅骨孔，徒手推入小鼠右尾状核。观察致瘤率、移植瘤的组 织细胞形态、相关标志物，结果表明，转移癌表现为不向周围止常脑组织侵袭，分泌酸性粘液，表 达癌胚抗原等生物学特征与亲本肿瘤一致：而胶质瘤向周边止常脑组织高度侵袭和表达表皮生长因 子受体等，也与亲本肿瘤～致。笔者认为肿瘤组织块直接注入小鼠脑内建立实验动物模型，比肿瘤 细胞恳液接种方法相对简易，移植瘤能更好地保持貌本肿瘤的特征。此方法，适合在人脑瘤免疫缺 陷鼠原位移植实验中应用。 二、侵袭性 取同一例原发为间变性星形细胞一室管膜细胞瘤原发灶，复发时进展为多犁性胶质母细胞瘤播散 x 灶中的肿瘤干细胞体外培养柏持续传代的细胞球约l 103个细胞h小1，在立体定向仪辅助卜．，接种 剑Nc系裸小鼠厶尾状核，在出现恶病质时处夕匕，取全脑行快速冰冻切片、HE染色、光学显微镜常 规病理观察；朋人特异的HLA(humanleucocyteantigen)单抗免疫组织化学染色观察移植瘤细胞 的侵袋性m“’。结果表明，常规病理，原发肿瘤干细胞为局部侵袭性生长，复发肿瘤干细胞为J’．泛侵 9 2009年“临床诊断和治疗新进展研究”暨“全国肿瘤病理诊断交流”研讨会 润、播散性生长。肿瘤细胞并未潴留在右侧尾核的穿刺点附近，而是广泛迁徙至同侧，甚至是对侧 的大脑半球及其软脑