质粒DNA提取.pptVIP

质粒DNA的提取方法 方法：碱裂解法；煮沸裂解；羟基磷灰石柱层析法，质粒DNA释放法；酸酚法等。 概括起来主要是用非离子型或离子型去污剂、有机溶剂或碱进行处理及用加热处理 所有分离质粒DNA的方法都包括3个基本步骤：培养细菌使质粒扩增；收集和裂解细菌；分离质粒DNA(有时还要求纯化质粒DNA，根据实验所需) 　　　　四、实验步骤 相关原理 相关原理解释 溶液I的作用 控制好溶液的pH，因此用适当浓度的和适当pH值的Tris-Cl溶液，是再自然不过的了。 葡萄糖后最大的好处只是悬浮后的大肠杆菌不会快速沉积到管子的底部。 如果溶液I中缺了葡萄糖其实对质粒的抽提本身而言，几乎没有任何影响。所以说溶液I中葡萄糖是可缺的。 EDTA是Ca2+和Mg2+等二价金属离子的螯合剂，配在分子生物学试剂中的主要作用是：抑制DNase的活性，和抑制微生物生长。 如果不加EDTA，其实也没什么大不了的，只要不磨洋工，只要是在不太长的时间里完成质粒抽提，就不用怕DNA会迅速被降解，因为最终溶解质粒的TE缓冲液中有EDTA。 如果哪天你手上正好缺了溶液I，可不可以抽提质粒呢？ 实话告诉你，只要用等体积的水，或LB培养基来悬浮菌体就可以了。 有一点不能忘的是，菌体一定要悬浮均匀，不能有结块。 溶液II 用新鲜的0.4 N的NaOH和2％的SDS等体积混合后使用的。 要用 新从