HPLC法测定土霉素片中的土霉素含量.pdfVIP

中 国 民 族 民 间 医 药 药 物 研 究 · 10 · Chinesejournalofethnomedicineandethnopharmacy Themedicine study HPLC法测定土霉素片中的土霉素含量 刘志会 天津市宝坻区药品检验所，天津 301800 【摘 要】 目的：建立高效液相法测定土霉素含量的方法。方法：采用Agilent—Cl8 (4．6mm×250mm，5m)色谱柱；流动相：醋 酸铵溶液 一乙腈 (85：15)；检测波长：280nm；流速：1．0ml／min；柱温：30C。结果：土霉素在 0．12—9．61xg范围内线性关系 良好，r= 0．9999，平均回收率为99．2％，RSD=O．6％ (n=6)。结论 ：该方法简便、准确、灵敏度高、重现性好，适用土霉素片的质量控制。 【关键词】 高效液相色谱法 ；土霉素；含量测定 【中图分类号】R927．2 【文献标志码】A 【文章编号】1007—8517(2015)06—0010—02 土霉素是多环并四苯酸基酰胺母核的衍生物，为一种 2．3 色谱测定 分别精密量取对照品溶液 (约0．1mg／m1) 广谱抗菌素，临床上主要用于革兰阳性菌 、阴性菌感染 ， 和供试品溶液 (约0．1mg／m1)各 lOI．d ，注入液相色谱仪 以及立克次体病 、衣原体病 、支原体病、螺旋体病 的治 测定，即得。见图1、2。 疗。目前土霉素片的含量测定方法为中国药典规定的抗生 mV 素微生物检定法，收载于卫生部药品标准 ·抗生素分册 (第一册)。该方法检验周期长、操作繁琐、影响因素多、 易造成误差，且不能满足批量生产质量控制的需要。笔者 采用高效液相色谱法取代效价法测定土霉素片的含量，其 检验周期短、结果准确 、重现性好、稳定性好，现报道 如下。 图1 土霉素对照品的HPLC图谱 1 仪器与试药 1．1 仪器 uV一2401PC紫外分光光度计 (日本岛津)； LC一2010AHT高效液相色谱仪 (日本岛津)；梅特勒 AG一 135型电子天平 ；梅特勒 TOLEDO型酸度计 (精度：0．01 pH单位)；KQ一5200E型超声波清洗器。 1．2 材料 土霉素对照品 (批号：130487—200302，含 图2 土霉素样品的HPLC图谱 量 ：88．2％，中国药品生物制品检定所)；土霉素片 (批 2．4 方法学考察 号：140113、140118、140105，规格：0．25g)；所用试剂均 2．4．1 精密度试验 精密量取土霉素对照品溶液 (0．1mg／ 为分析纯。 m1)101,d，注入高效液相色谱仪，重复进样6次，RSD为 2 方法与结果 0．1％，说明精密度 良好。 2．1 色谱条件 色谱柱：AgilentTM —C18 (4．6mm × 2．4．2 线性关系考察 取上述土霉素对照 品溶液 (0．1 250mm，5Ixm)色谱柱；流动相 ：醋酸铵溶液 [0．25mol／L ms／m1)，分别精取 1、3、5、10、20、40、60、80 l，注 醋酸铵溶液 一0．05mol／L乙二胺四醋酸二钠溶液 一三乙胺 入液相色谱仪 (自动进样)，记录峰面积。以进样量对峰面 (100：10：1)，用醋酸调节pH值至7．5] 一乙腈 (85：15)；