p75NTR阳性舌鳞癌细胞的生物学特性的研究.pdfVIP

化学法、蛋白印迹(Western-blot)技术检测不同浓度蒿甲醚作用舌鳞癌细胞48h后Survivin蛋白的表达情 况。结果 100、200和300 μg/ml浓度的蒿甲醚作用于舌鳞癌细胞48h，经流式细胞仪检测，其早期凋 亡率分别为2.92％±0.18％、3.73％±0.67％、6.46％±0.46％与对照组比较逐渐增加，但是其中100和200 μg/ml组比较，差异无统计学意义(P＞0.05)，其它各组差异具有统计学意义(P＜0.05)；其凋亡率 （亚倍 体峰）分别为3.63％±1.29％、4.37％±0.70％、8.36％±1.45％与对照组比较逐渐增加，但是其中对照组 和100μg/ml组、100μg/ml和200μg/ml组比较(P＞0.05)，差异无统计学意义，其它各组差异性具有统 计学意义(P＜0.05）。随着蒿甲醚浓度的增加，舌鳞癌细胞中Survivin表达呈逐渐减弱的趋势。结论 蒿 甲醚对舌鳞癌细胞有凋亡诱导作用，且有些浓度之间的差别具有统计学意义，通过下调Survivin表达可 能是蒿甲醚诱导舌癌细胞凋亡的机制之一。 [关键词]蒿甲醚；舌鳞癌；Tca8113细胞；凋亡；Survivin p75NTR阳性舌鳞癌细胞的生物学特性研究 张风河 佟冬冬 姚瑶 山东大学口腔医学院口腔颌面外科 [摘要] 目的 研究p75NTR在舌鳞癌细胞系中的表达，并通过对舌鳞癌细胞系流式细胞仪分选获得 的p75NTR阳性细胞进行生物学特性研究，探寻p75NTR阳性细胞是否具有肿瘤干细胞的特性。方法 对舌鳞 状细胞癌细胞系Tca-8113和Cal-27进行流式细胞检测，检测癌细胞中p75NTR的表达。再通过流式细胞仪 分选获取p75NRT阳性舌鳞癌细胞。并通过细胞免疫组化，单克隆技术，MT实验体内成瘤实验等进行增 殖能力、自我更新、多项分化能力和成瘤能力的检测。结果 p75NTR在舌鳞状细胞癌细胞系中有阳性 表达，百分比约为3.1％(Tca-8113)和1.9％(Cal-27)。CD44在舌鳞癌细胞系Tca-8113和Cal-27p75NTR阳性 细胞中高表达所占比例大约为50％。在舌鳞癌细胞系Tea-8113和Cal-27中p75NTR阳性细胞与未分选的 对照组细胞相比，p75NTR阳性细胞的单克隆形成能力较同源的未分选的对照组细胞的单克隆形成能力 相比均显著增高 （P＜0.01）；单克隆化后的p75NTR阳性细胞在培养两周后，检测到大量p75NTR阴性细胞， p75NRT细胞的比例下降到14.5％;MTT实验证明p75NTR阳性细胞生长均较迅速(P＜0.01）；同时相对于未 分选的细胞具有更强的迁移能力；p75NT阳性细胞与未分选的对照组细胞相比，裸鼠体内致瘤能力无 显著统计学意义，但p75NTR阳性细胞组成瘤速度快。结论 p75NTR阳性细胞具有较强的增殖能力、迁移 能力、自我更新和分化能力以及较快的成瘤能力，且能够在产生的子代细胞中保持其细胞特性，并能分 化产生其它表型的细胞(p75NTR阴性细胞)。说明p75NTR阳性舌鳞癌细胞具有肿瘤干细胞的特性。为进一 步研究舌鳞癌干细胞提供了一种有效的方法和途径，也为进一步从肿瘤干细胞角度研究舌鳞状细胞癌 的发病机理和寻找新的治疗靶点提供了线索。 [关键词]舌鳞状细胞癌；Tca-8113;Cal-27;肿瘤干细胞；p75NTR;流式细胞仪分选；单克 隆；成瘤能力