不同强度压应力对人骨髓间充质干细胞增殖作用的实验的研究.pdfVIP

TGF-B1诱导时，粘附细胞数量 结论TGF-13l具有调节成骨细胞粘附特性的作用，10ng／ml 增加最明显，说明该结果可能对骨组织工程研究中，促进成骨细胞与基质材料间的粘附特性 具有重要意义． 显微CT中的血管重建技术 汪爱嫒彭江眭翔张莉郭全义王鑫卢世璧 解放军总医院骨科研究所 目的：显微CT技术目前已广泛用于骨组织微观结构的重建和分析。而由于软组织和血管在 显微CT图像中的对比度较弱，无法直接进行扫描重建。因而为了进行微缅血管的显徽结构 观察，必须对血管进行增强扫描。 材料和方法：实验动物采用3月龄SD大鬣，10％水合氯醛麻醉，显露大鼠心脏主动脉，增 强剂采用硫酸钡粉末，按40％的比例与特制铸型剂混合后，经主动脉灌注，直至肝、肾、 脑等脏器出现铸型剂的显影。将肝、肾、脑等器官取出。4％多聚甲醛固定后，置入Micro-CT 扫描床(GE eXplore 图像采用种子区域增长算法提取血管边界，并显示等值面三维图像和MIP投影图像． 结果：扫描图像经三维重建显示肝、肾、脑组织内血管网络清晰，可以为后续评价和研究提 供可靠依据。 不同强度压应力对入骨髓间充质干细胞增殖作用的实验研究 ’ 刘涌周强·曹炜鹏郭平宋磊蒲小兵郭丛涛 第三军医大学附属西南医院骨科 目的：压应力对骨的发育、改建、修复起着十分重要的作用。因此其也必将对体外组织工程 ’胃’的构建起到重要作用，但由于仪器设备的限制，目前仍很少在组织工程骨的构建和研究中 stem ceils，MSCs)是组织工程骨重要的种子细胞， 应用。骨髓阃充质干细胞(mesenchymal 压应力对MSCs的作用目前尚不清楚。本实验旨在研究不同强度的压应力刺激对体外MSCs 增殖的作用，以期找出促进MSCs增殖的适合压应力强度范围。探求压缩应变促进人骨髓间 stem 充质干细胞(human cells。hMSCs)增殖的适合幅度。为研制新型生物反 mesenchymal 应器，模拟仿生环境构建组织工程骨以及进一步研究压应力促进MSCs增殖的机制提供实验 依据。 方法：无菌抽取20—30岁健康志愿者两侧髂骨骨髓5～10ad，应用密度梯度离心法和贴壁培 329 养法分离原代MSC。以脱钙骨基质(demineralizedbonematrix，DBM)(由第三军医大学西 南医院全军矫形外科中心提供)为支架，应用凝胶双相接种法构建组织工程骨，并将其置入 压应力施加模拟机(第三军医大学西南医院骨科设计、制造)中培养，对其施加频率为0．SHz， 压缩幅度分别为2％、5％、10％、15％、20％的压应力刺激hMSCs，2h／d。光镜观察细胞形 态，M-丌法和流式细胞技术检测细胞增殖水平及生长周期。 结果：MrI’检测及生长曲线绘制：各实验组均与对照组有明显差异(p0．05)，其中压幅分 别为2％、5％、10％的实验组均可促进细胞增殖．尤其以压幅为10％组最明显，细胞生长曲 线明显前移，生长高峰期延长，峰值升高；而压幅为15％、20％的实验组则抑制细胞增殖， 细胞生长曲线后移，生长高峰期缩短，峰值降低。细胞周期检测：压幅分别为2％、5％、10％ 较对照组(19．15_+0．26)％增高50．86％，高于其它两组。而压幅为15％、20％的实验组S期细 胞百分比降低cpo．05)，这种改变与MTT方法测定的结果是相吻合的。当压缩幅度为2％、 5％、10％时压应力刺激可促进hMSCs增殖：压缩幅度为15％、20％时压应力刺激抑制细胞 增殖，其中以10％压缩幅度刺激细胞增殖效果最为显著，生长曲线比对照组明显前移，S期 细胞百分比(28．89：10．25)％较对照组(13．57±o．55)％增高107％。 结论：实验结果表明压应力的强度对hMSCs的增殖有重要影响，压应力刺激强度的不同， 对hMSCs增殖的作用也不同，说明hMSCs对压应力的感受可能存在一定的“域值”，在一定 范围内压应力可显著促进hMSCs的增殖，超过这—“域值”则抑制细胞增殖，损伤细胞。通 过本实验，我们认为5％．10％强度