高通量基因功能的研究技术.pdfVIP

·233· 高通量基因功能研究技术 韩永梅 侯占铭 【摘要】随着各生物基因序列的测序完成，研究基因的功能成为了现在最主要的任务。高效、快捷、简便的研究技术，是基因功能 研究中不可缺少的。本文简要介绍了几种高通量基因功能研究的技术。 【关键词】基因克隆VIGS技术；TILING技术 Research of function 砸gh-throughputTechnologygene Han Hou Inner Normal ofLife and Inner Science Yongmei Zhanming}MongoliaUniversity，Cofiege TechnologyMongoIia Hohhot 010022) the ofthe of to functionhasbecomethemaintasknow． 【Abstract]With completionsequencingbiologicalsequencesstudygene research of is functionessential．Thisoutlinesantunberof Efficient,fast,simpletechniques，thestudygene paper high-throughput functionstudiesof gene technology． [KeyWords】genecloning；VIGStechnology；TILINGtechnology 随着人类基因组计划(HGP)的顺利进行，生物医成本低廉、保真度高和易于在不同体系中穿梭的高 学研究已进入后基因组时代(post—genomeera)t¨。基 通量研究体系的了解和使用已经成为基因组水平 因组学的研究发生了翻天覆地的变化。已从结构基 研究的重要问题。因此，高通量基因功能研究的技术 因组学(structural 成为功能基因组学研究中不可或缺的有力工具，且 genomics)过渡到功能基因组学 由此也带动了基因功能研究的发展。为此，该文对目 (functionalgenomics)。功能基因组学以揭示基因组 的功能及调控机制为目标，功能基因组学的研究是 前存在的几种高通量研究基因功能的方法做了简 2l世纪国际研究的前沿，也是最热门的研究领域之 要的介绍。 一。从1997年迄今，已发表的有关功 能基因组学的论文数以干计，其中不少发表于 1。高通量的基因克隆 国际上最著名的一些杂志。如Cell、Nature、Science 等。中国国家自然科学基金近几年来在生命科学领 高通量克隆是一个零背景、高通量定向表达克 域的 隆技术。高通量克隆i41首先是克隆载体引入特殊接 重大、重点项目、国家重点基础研究发展计划 头。可用特殊的限制性内切酶消化；PCR引物的5’ (973计划1、国家高技术研究发展 端分别引入2—5个特定的脱氧核苷酸，扩增到的产 计划(863计划)以及国家杰出青年科学基金项物经T4聚合酶处理后。会产生不能匹配的粘性末 目中的相当一部分就是属于功能基因组学的研究 端，恰好能与载体经特殊限制性内切酶消化后的末 项目鲫。随着基因克隆和表达的发展，对使用简便、 端匹配．使外源片段定向克隆到载体上，无需判断 基因插入方向。此方法适合目前所有DNA聚合酶