2008抗体生产纯化技术.pdfVIP

中国生物工程杂志　ＣｈｉｎａＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２００８，２８（１０）：１４１～１５２ 檪檪檪檪檪檪檪檪殏 檪 殏 殏檪檪 技术应用殏檪 檪檪檪檪檪檪檪檪 抗体生产纯化技术  孙文改 　苗景 （通用电气医疗集团ＬｉｆｅＳｃｉｅｎｃｅｓ　北京　１００１７６） ? 摘要　自１９９７年ＦＤＡ批准第一个治疗淋巴癌的嵌合单抗药物Ｒｉｔｕｘａｎ，ＡｎｔｉＣＤ２０抗体上市，并 ? ? 进入５６个国家，至２００７年，ＦＤＡ已批准了２０多种治疗性单抗药物，约一半用于治疗癌症，７个已 成为年销售额超１０亿美元的“炸弹药物”。而随着高细胞密度培养及表达技术：大规模培养的表 达水平从１ｇ／Ｌ到５ｇ／Ｌ；细胞的培养规模越来越大从 １２０００Ｌ到１５０００Ｌ和在建的２００００Ｌ细胞培 养规模，同时多个细胞培养罐并行运行；这些都极大地推动了大规模蛋白质纯化技术的发展：从 批产几公斤到年产几十公斤抗体，发展到批生产几十公斤至年产上十吨抗体的规模。同时，新型 凝胶技术、更大规模的纯化生产系统技术和膜过滤技术的发展，使经典的三步层析技术能够缩短 到两步层析技术生产抗体，进一步节约了投资，提高了产能和产率。详细介绍了最新发展的两步 层析主导的一条完整抗体生产纯化解决方案。 关键词　抗体　纯化 中图分类号　Ｑ８１９ 些抗体如果通过优化结果不甚满意，通过增加一步 １　新型的两步层析技术与整个纯化解决方案 ＣａｐｔｏＱ也基本上可以达到要求或是采用ＣａｐｔｏＳＣａｐｔｏ ? 　　ＭａｂＳｅｌｅｃｔＳｕＲｅ的卓越性能以及 ＣａｐｔｏＡｄｈｅｒｅ的 Ｑ的工艺步骤。 复合多除杂功能，使得抗体纯化工艺由经典的三步层 析转变为两步层析得以实现。ＦＤＡ前验证顾问 Ｇａｉｌ Ｓｏｆｅｒ在接受采访时表示，两步层析在验证、内毒素的去 除等问题上都不会存在障碍。两步层析的整个工艺该 怎样设计才能够最大化收率甚至产率，而又保证我们 的产品完全合格呢？因此除了两步层析工艺外，还需 要在整个纯化工艺上做文章。 　　在细胞培养表达以后，采用０．２～０．４５ｍ的中空 μ 纤维膜技术进行澄清（Ｃｅｌｌｒｅｍｏｖａｌ），然后用 ＭａｂＳｅｌｅｃｔ ＳｕＲｅ捕获，酸性条件洗脱后直接 ｐＨ４．０病毒灭活，澄 清过滤后穿透方式上ＣａｐｔｏＡｄｈｅｒｅ，这一步离子交换之 前或之后会有一步２０ｎｍ纳滤去病毒，最后５０Ｋ膜超滤 图１　抗体生产两步层析法主导的抗体纯化最新工艺 浓缩和洗滤进行缓冲液置换。整个工艺如图１，这一工 Ｆｉｇ．１　Ｔｈｅｕｐｄａｔｅｄｔｗｏｓｔｅｐｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ ? 艺平台已经尝试过多个不同的抗体并取得成功，同时 ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｐｒｏｔｏｃｏｌｏｆａｎｔｉｂｏｄｙ 很多实验表明这一工艺平台适合多数抗体的生产。有 收稿日期：２００８０９０８　　修回日期：２００８０９２３ 电子信箱：ｗｅｎｇａｉ．ｓｕｎ＠ｇｅ．ｃｏｍ １４２ 中国生物工程杂志 ＣｈｉｎａＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｖｏｌ．２８Ｎｏ．１０２００８