结核分枝杆菌PCR检测试剂盒国家参考品的研制_陈保文.pdfVIP

中国生物制品学杂志2012 年5 月第25 卷第5 期 Chin J Biologicals May 2012 ，Vol. 25 No. 5 · · 605 · · 诊断制剂 结核分枝杆菌PCR 检测试剂盒国家参考品的研制 陈保文，沈小兵，苏城，王国治 【摘要 】 目的 研制结核分枝杆菌PCR 检测试剂盒国家参考品。方法 将结核分枝杆菌标准株H R 、15 株结核分枝 37 v 杆菌临床分离株、10 株非结核分枝杆菌标准株和5 株非分枝杆菌参考株在各自适宜的培养基和温度下进行培养，收集新鲜且无 污染的培养物，采用比浊法制备阳性和阴性参考品用菌液；膜过滤法制备最低检出量和精密性（或重复性）参考品用单细胞菌 液，并进行活菌计数和显微计数；对最低检出量参考品进行冻融试验、加速试验，并对4 个厂家的结核分枝杆菌PCR 检测试剂 盒进行评价。结果 阳性参考品由15 份结核分枝杆菌菌液组成，阴性参考品由10 份非结核分枝杆菌和5 份非分枝杆菌菌液 3 2 1 0 组成，最低检出量参考品由10 、10 、10 和 10 个／ ml 的结核分枝杆菌（H R ）单细胞菌液组成，精密性（或重复性）参考品由10 37 v 2 份10 个／ ml 的结核分枝杆菌（H R ）单细胞菌液组成。结论 研制的结核分枝杆菌PCR 检测试剂盒国家参考品可用于结核分 37 v 枝杆菌PCR 检测试剂盒的质量控制。 【关键词】 结核分枝杆菌；聚合酶链反应；试剂盒，诊断；国家参考品 【中国图书分类号】R378. 91 ＋ 1 Q78 【文献标识码】A 【文章编号】 1004-5503 （2012）05-605-03 Preparation of national reference for PCR detection kit for Mycobacterium tuberculosis CHEN Bao-wen，SHEN Xiao-bing ，SU Cheng，WANG Guo-zhi （National Institutes for Food and Drug Control ， Beijing 100050，China） 【Abstract 】 Objective To prepare national reference for PCR detection kit for Mycobacterium tuberculosis . Methods Stan－ dard M. tuberculosis strain H R ，15 clinical isolates of M. tuberculosis