两种启动子对聚γ-谷氨酸降解酶基因在地衣芽胞杆菌中的加强表达效果.pdfVIP

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2017-08-12 发布于北京
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2012-06-25 DOI: 10.3724/SP.J.1145.2012.00450 / Chin J Appl Environ Biol 2012 18 ( 3 ) : 450~454 应用与环境生物学报，两种启动子对聚γ-谷氨酸降解酶基因在地衣芽胞杆菌中的加强表达效果* 1 1 2 1 1 1** 付军涛祁高富刘军冀志霞马昕陈守文 1 （华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉 430070） 2 （武汉工业学院生物与制药工程学院武汉 430023） γ- γ-PGA . 摘要聚谷氨酸（）是一种应用前景良好的生物高分子材料比较了蔗糖诱导的枯草芽胞杆菌果聚糖蔗糖酶 SacB α- γ-PGA ywtD 基因（）启动子和地衣芽胞杆菌淀粉酶基因启动子对降解酶基因在地衣芽胞杆菌中加强表达的影响. 分别用SacB基因启动子和α-淀粉酶启动子构建了穿梭表达载体pHY300-SYT和pHY300-PYT，通过电转化地衣芽胞杆菌 WX-02获得重组子SYT和PYT. 酶活测定结果显示 SYT和PYT 中γ-PGA降解酶基因ywtD 得到加强表达，摇瓶发酵 γ-PGA 1 000 000~1 200 000 800 000~900 000 PYT γ-PGA 结果显示两个重组菌株的相对分子质量都由降低为，的产量较 -1 -1 -1 PLK 33% 13.50 g L 17.97 g L SYT γ-PGA 10.85 g L . α- 对照菌株提高了，由提高到，而的产量则降低为因此，淀粉酶启动 WX-02 γ-PGA γ-PGA . 3 4 24 子更适合于在地衣芽胞杆菌菌株中表达降解酶基因，从而获得高产低分子量的工程菌图表参 γ-