CMV-HRP工艺规程.docVIP

文件类型 工艺规程 版 本 号 V3.0 文件名称 CMV-HRP制备工艺规程 文件编号 KY-STP-006 编 写 人 审 核 人 批 准 人 起草日期 审核日期 批准日期 颁发部门 质量管理部 文件生效日期 分发部门 科研部 颁发份数 1份 受控编号 目 录 1．名称、组成及用途 2．生产工艺流程图 3．液体配制 4．本产品工艺过程中所需的SOP名称及要求 5．抗原原料的质量标准和检验方法及贮存注意事项 6．设备一览表： 7．综合利用和三废处理 CMV-HRP生产工艺规程 1．产品名称、组成及用途 名称：巨细胞抗原酶标结合物生产工艺规程 组成及用途：巨细胞抗原与辣根过氧化物酶的结合物，用于生产。 2．生产工艺流程图 制备工艺流程图 3.　液体配制 3.1 LB液体培养基的配制： 3.1.1标准配方： 胰化蛋白胨 10g 酵母提取物 5g 氯化钠 10g 纯化水定容至1000.0ml 3.1.2配制方法： 按照标准配方内容准确称取胰化蛋白胨、酵母提取物、氯化钠并加纯化水800.00ml，搅拌使充分溶解后，使用纯化水定容至1000.00ml，混合均匀高压灭菌后，室温保存备用。 3.2 Tris缓冲液的配制： 3.2.1标准配方： TRIS碱 6.05 g 浓盐酸 适量 纯化水定容至1000.00ml 3.2.2配制方法： 按照标准配方内容准确称取TRIS碱6.05 g，加纯化水800.00ml，搅拌使充分溶解后，加入浓盐酸适量，搅拌均匀，使用数显酸度计测量液体的PH值为8.0左右，使用纯化水定容至1000.00ml，室温保存备用。 3.3尿素的配制 3.3.1标准配方： 尿素 480g TRIS碱 5g 浓盐酸 适量 纯化水定容至1000.00ml 3.3.2配制方法： 按照标准配方内容依次准确称取尿素、TRIS碱，加纯化水200.00ml，搅拌使充分溶解后，加入浓盐酸适量，搅拌均匀，使用数显酸度计测量液体的批PH值为8.0左右，使用纯化水定容至1000.00ml，过滤后液体室温保存备用。 3.4碳酸缓冲液的配制： 3.4.1标准配方： 碳酸钠 1.59g 碳酸氢钠 2.93g 纯化水 800.00ml 纯化水定容至1000.00ml 3.4.2配制方法： 按照标准配方内容准确称取各试剂组分，加纯化水800.00ml，搅拌使充分溶解后，使用数显酸度计测量液体的批PH值为9.4～9.5，定容至1000.00ml，室温保存备用。 3.5醋酸钠缓冲液的配制： 3.5.1标准配方： 醋酸钠 0.082 g 冰醋酸 适量 纯化水定容至1000.00ml 3.5.2配制方法： 按照标准配方内容准确称取醋酸钠，加入纯化水900.00ml搅拌充分溶解后，加入冰醋酸适量，搅拌均匀，，用纯化水定容至1000.00ml， 室温保存备用。 3.6 硫酸卡那霉素的配制： 3.6.1标准配方： 硫酸卡那霉素 1g 纯化水定容至100.00ml 3.6.2配制方法： 按照标准配方内容准确称取硫酸卡那霉素，加入纯化水100.00ml搅拌充分溶解后，用0.22um的滤器过滤除菌，-20℃保存备用。 3.7 磷酸缓冲液的配制： 3.7.1标准配方： 氯化钠 80g 氯化钾 2 g Na2HPO4·12H2O 29 g K2HPO4 2 g 纯化水定容至1000.00ml 3.7.2配制方法： 准确称取各组分，加入纯化水900.00ml，搅拌充分溶解后定容至1000ml，测定溶液的PH应为6.9～7.0，室温保存备用。 3.8 IPTG的配制： 3.8.1标准配方： IPTG 2.383 g 纯化水定容至100.00ml 3.8.2配制方法