病毒及其病毒与宿主细胞的电子断层扫描技术研究进展.docVIP

病毒及其病毒与宿主细胞的电子断层扫描技术研究进展 张勤奋，李晶 电子断层扫描技术简介 1．1电子断层扫描技术图像获得 断层扫描技术（Tomography）是重一个物体的投影图像重构获得物体内部结构的技术。简单地说，电子断层扫描技术就是将一个物体沿着一个与电子束垂直的轴旋转，每旋转一个角度，获得一这个物体在相对应方向上的二维投影像，将这些像组装起来，获得样品整体三维结构的技术（图1）。为了尽可能对样品进行整体成像，在沿一个轴倾转后，将样品旋转90度后，沿另一个与第一轴垂直的轴再进行旋转成像，也就是所谓的双倾成像。这项技术的工作原理与医院中使用的CT扫描有点类似。与蛋白质电子晶体学（electron crystallography）和单颗粒技术相比，这种技术无需样品颗粒具有等同性，也不强调样品具有一定的对称性。因此，虽然目前这种技术所获得的结构的分辨率不能与上两种技术相比，利用这种技术至今只能获得50－60埃左右分辨率的结构，但其在研究非定形、不对称和不具等同性的生物样品的三维结构和功能中有着不可替代的重要作用。 电子断层扫描技术可以与多种技术结合起来使用。首先，它可利用常规的半薄切片技术，将样品利用常规固定或冷冻固定方法固定，并进行半薄切片，使具有一定大小的样品保存在一定的介质中，然后进行电子断层扫描研究。这种方法的缺点是因为首先要进行样品固定并包埋等，所有半薄、超薄切片方法中存在的