固定化乳酸脱氢酶的催化性质研究.pdfVIP

第 33卷第 l期 中南民族大学学报 (自然科学版) V01．33No．1 2014年3月 JournalofSouth—CentralUniversityforNationalities(Nat．Sci．Edition) Mar．2014 固定化乳酸脱氢酶的催化性质研究 柳畅先，宁 静，俸红梅 (中南民族大学 化学与材料科学学院，武汉430074) 摘 要 研究了固定化乳酸脱氢酶(LDH)的制备和催化性质 ，讨论了戊二醛体积分数、酶的偶联时间、pH值对酶 固定化的影响．对游离酶和固定化酶催化性质的研究结果表明：酶促反应最适 pH分别为9．2和 10．2，最适温度分 别为51~C和50℃，米氏常数分别为 16．2mmoVL和0．7mmolfL．与游离酶相比，固定化酶的活力稳定性更佳，有更 好的贮存稳定性和复用性． 关键词 乳酸脱氢酶；固定化 ；壳聚糖；酶催化性质 中图分类号 TQ032；0652 文献标识码 A 文章编号 1672-4321(2014)01-0015-04 StudyontheEnzymaticCharacteristicsof ImmobilizedLactateDehydr0genase LiuChangxian，NingJing，FengHongmei (CollegeofChemistryandMaterialScience。South—CentralUniversityforNationalities，Wuhan430074，China) Abstract Inthispaper，thepreparationandenzymaticcharacteristicsofimmobilizedlactatedehydrogenase(LDH)was studiedand the impactofglutaraldehyde concentration，enzymebinding timeandpH valueon immobilization were discussed．Theresultsofthestudyon theenzymaticcharacteristicsoffreeand immobilized enzymesshowedthatthe optimum pH valueofrtheenzymaticreactionwere9．2and10．2，theoptimum temperatureswere51oC and50℃ ，theK valuewere16．2 mmol／L and0．7 mmol／L respectively．Itwasshown thatthe immobilized enzymehasbetteractivity stability，storagestabilityandreusbaility． Keywords lactatedehydrogenase；immobilization；chitosan；enzymaticcharacteristics 固定化酶是用适当方法将酶固定于一定空间 水浴恒温振荡器 (SHA—C型，江苏医疗仪器 内，在保持 自身特性时又能再回收和重复使用的酶 厂)，紫外可见分光光度计 (752型，上海光谱仪器有 制品．20世纪7O年代 以来对固定化酶的研究非常 限公司)，精密 pH计 (PHS．3C型，上海雷磁仪器 活跃 ]，其领域多为应用基础、工业生产等 引．壳 厂)，分析天平 (FA-2004型，上海精科天平)，超级 聚糖是甲壳素的脱乙酰基产物，分子链中存在大量 恒温水浴槽 (CS．501型，武汉实验仪器厂)，集热式 的氨基和羟基，可通过改性和交联，使其具有更多的 恒温加热磁力搅拌器 (DF-101S型，河南省予华仪器 功能rm