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Shimadzu/Kratos 基质辅助激光离子化飞行时间型质谱仪AXIMA – CFR 应用文集 No. 5 基质辅助激光离子化飞行时间质谱仪 应用文集 No. 5 MALDI-TOF 应用分析实例 1. MALDI-TOF 测定直链多糖 2. AXIMA-CFR 进行蛋白质组分析实例 3. 采用Seamless PSD 测定和鉴别植物凝血素 4. 5. 采用数据库检索确定蛋白质 - Seamless PSD 测定进行MS-Tag 法的应用 第 1 页共 5 页 吉诺思科贸有 限公司 Genosys Tech-Trading Co., Ltd. Shimadzu/Kratos 基质辅助激光离子化飞行时间型质谱仪AXIMA – CFR 应用文集 No. 5 1．采用MALDI-TOF 测定直链多糖 Pullulan 是由 3 个葡萄糖形成多丙糖结合成链状的中性单纯多糖。作为食品、药品的添加剂被广泛 使用。使用 AXIMA-CFR 可以观察到最小重合单位的葡萄糖(a ：fM=162) 的碎片以及多丙糖单位(b ： fM=486) 的碎片。 MALDI-TOF MS (AXIMA-CFR)的质谱图 2 ．采用AXIMA-CFR 进行蛋白组分析的应用实例 蛋白质网络分析的蛋白组分析是后基因组研究内容，以 AXIMA-CFR 进行蛋白组分析，这个实例说 明分析蓝藻(Anabaena sp. PCC7120 株)的蛋白组分析。 多肽指纹图 (Peptide Mass Finger Print, PMF) PMF 法是使用质谱仪确定蛋白质方法的一种。首先将待分析的蛋白质用双向电泳等设备分离，然后 用胰蛋白酶消解，获得的多个多肽的消解片段。接着将此组数据和 DNA · 蛋白质数据库计算的理论值 相比较进行确定。图 1 是双向电泳图(a)和其中一点的 PMF 质谱图(b)。根据PMF 方法，该蛋白质被确 定与图2 中的遗传产物相同。 图1：Anabaena sp. PCC7120 株的全蛋白质双向电泳图(a)和PMF 谱图(b) 第 2 页共 5 页 吉诺思科贸有 限公司 Genosys Tech-Trading Co., Ltd. Shimadzu/Kratos 基质辅助激光离子化飞行时间型质谱仪AXIMA – CFR 应用文集 No. 5 遗传产物 全长氨基酸序列 A29674 ： VK(1) TPITEAIAAADTQGR(2) FLGNTELQSAR(3) GR Anabaena sp. PCC 7120 YER AAASLEAAR(4) GLTSNAQR LIDGATQAVYQK C-PHYCOCYANIN ALPHA PYTTQTPGPQFAADSR(5) GK SK CAR DVGHYLR IITYSLVAGGTGPLDEYLIAGLAEINSTFDLSPSWYVEALK CHAIN HIK ANHGLSGQAANEANTYIDYAINALS(6) 图2 ：被确定蛋白质的遗传物质及编码的蛋白质全长氨基酸序列，() 内的数字对应图1 中的数字 PSD 分析(Post Source Decay) 采用 PSD 进行 MS/MS 分析是分析多肽结构的有效方法，由 Curved