戊型肝炎患者粪便中病毒RA的半定量检测N.pdfVIP

7 · 370 · 铁道医学 2000年 第 28卷 第 6期 戊型肝炎患者粪便中病毒 RNA的半定量检测 呈兰型，量煎：√，张建琼，赵宇，林 陵 4。c26、6】jj7 (1．南京铁道医学院 微生物学和免疫学教研室，江苏 南京 210009；2．南京医科大学 传染病学教研室，江苏 ’南京 21002(9) [摘要]目的 探讨戊型肝炎病毒(HEV)R~A半定量检测的意义和可行性 ，为HEVRNA的定量 PCR(多聚酶链反应) 检测提供科学依据。方法 在逆转录一套式PCR基础上 ，采用样品倍比稀释法对戊型肝炎患者粪便中病毒 RNA作半定 量检测。结果 ∞份粪便标本中有 14份检测结果阳性 ，其中病毒 RNA拷贝水平为8×1 、8×l0T、8×l08、8×l PCR单 位 ·m【的分别为2、10、1、I份。对同一标本而言，在不同稀释度时，其 PCR产物在量上无显著差异。结论 定量 PCR技 术检测戊型肝炎病毒RNA是可行的，但应以起始模板来定量而不是以终产物定量。 [关键词】戊型肝炎病毒；核糖核酸；多聚酶链反应；塞里堡 型 RA H亡V 【中图分类号】R373．2 1 [文赫标识码】A [文章编号】1001一o912(20o0)06—0370—03 蟊 凳 IX Semi—quantitativedetectionofhepatitisEvirusRNAfrom stoolsofpatientswithhepatitis‘脚 Hai-qin．DONG 12，ZttANGflaa-qiong， 1．DepamneatofMjcmb词。 andImmunology，NanjingRailwayMedlealCollege，Na．jing210009，China； 2．D叩arⅡn ofLoemology，N蚰j MedicalUniversity，N 210029，China Abstract：Objective Toinvestigatethesigr,ificanceandfeasibilityofquantificationofhepalillsEvi衄 RNAfromstools0fpa- fieatswitllhepatitisEandgivesdeatiilc forquantitativedetectionofitbyRT—nestedPCR anddetectionofRNA 0f ru髑 ． Meth- ods A semi—qua~tatlved ofHEV RNAw日snu~lebyserialdilutionofthespecimensno thebasisof RT—nestde PCR Rtmllts 14speelmeltsposith,eamonghte20clinicalspcdm~ andhtecopiesofRNA wereabout8×1 PC Runit-ml一 f‘0r2spec． inmns，8×lPcRunit-ml一缸 10peclmcns，8×l08POtunit·ml一and8×109PcRunit·m／～eadJfor】specbne~．Buethere哪 lit- tiedaterenceamongthem dⅡnof finalproductsforHEVRNART—nestde PC R．Conclu~on Thequantificationof HEVRNAbvliT— nestedPCRisfeasiblebutthequantityofHENRNAshouldbedetermindebytheinitialcDNAnotPCRproducts． Keywords：ID t Evires；rlbonueleicadd；polymemsechainreacon：serrIi—qumlfita~vedetection (Ra／／rax；．,Mealc／a／Joarad，