重组人肿瘤坏死因子a粗提取的集成化工艺.pdfVIP

重组人肿瘤坏死因子a粗提取的集成化工艺 朱爱华’王 莉’王云山2 苏志国2 马润宇’ (1.北京化工大学化学工程学院，北京 100029;2.中国科学院过程工程研究所，北京100080) 摘要 通过研究重组人钟瘤坏死因子a(rhTNF-a)的粗提取工艺中各操作条件对目标蛋白纯化的影 响，发展了一条纯化rhTNF-a的集成化工艺。该工艺组合细她破碎，热吏性与硫艘按分极沉淀，有 效节省离心步赚，缩姐工艺流程，所得粗提物中目标蛋白占总蛋白含蚤的57%，目标蛋白回收率为 90.3%，活性回收率为85.8%，各项相标均比未集成的工艺有较大程度上的提高。 关扭词 肿摘坏死因子 珠磨玻碎 集成 蛋白质纯化 肿瘤坏死因子a(Tumornecrosisfactora,TNF-a)是一种由内毒素激活的巨噬细胞产生的仅 对肿瘤细胞有杀伤力而对正常细胞无细胞毒作用的非种属特异性活性因子，同时也是机体炎症与 免疫的重要调节因子。它是一种含有 !57个氨基酸的非糖基化蛋白，相对分子量大约为17350, 其热稳定性好，天然活性形式是三聚体Ul。早在1984年，美国生物学家就成功地在大肠杆菌中 克隆表达了人肿瘤坏死因子。由于重组表达的TNF大都分泌在胞内，因此分离TNF必须先破碎 细胞