重组蛋白分离纯化的方法策略及案例介绍.pdfVIP

活性蛋白整体方案 重组蛋白分离纯化的方法策略及案例介绍 关键词：重组蛋白表达，蛋白表达纯化，蛋白表达 描述：本文旨在介绍蛋白分离纯化时的处理策略，注意事项以及纯化方法等，并附有纯化案例介绍。 分离纯化处于重组蛋白表达的下游处理（downstreamprocessing）阶段，且与上游过程紧密相联，如是否带 有亲和标签，是否进行分泌表达等。所以在对目的蛋白表达纯化 ，要统一考虑和整体设计，并充分考虑上游对下 游的影响。同 ，不同的表达系统和培养方法也影响下游的处理过程：目的蛋白表达是否形成包涵体，目的蛋白表 达定位（胞内、细胞膜内、周质空间和细胞外） 表达策略 优点 缺点 增强正确二硫键的形成 降低蛋白酶对表达蛋白的降解 表达水平低 分泌表达至细胞外 可获得确定的N末端 多数蛋白不能进行分泌表达