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发酵过程中染菌的有效控制及预防
邢攀科
摘要:针对微生物发酵过程中的染菌现象,分析了导致发酵染菌的几种主要原因,并提出了有效控制方法,以预防为主,及时观察分析,杜绝发酵染菌的隐患。
关键词:发酵 染菌 微生物发酵
前言:杂菌感染,简称染菌,普遍存在于微生物发酵工业生产中。特别是夏季,随着气温的不断升高.在丙酮、醇粮食发酵法工业生产中尤其突出[5]。发酵过程是利用某种特定的微生物在一定的环境中进行新陈代谢,从而获得某种产品。现代发酵工业要求纯种培养,不仅斜面、种子和培养基以及发酵罐、管道等须经严格灭菌除去各种杂菌,而且在需氧发酵中通入的空气也需经过除菌处理。只有这样,才能确保生产不受杂菌污染,从而保证生产菌的旺盛生长。染菌的结果,轻者影响产量或产品质量,重者导致倒罐,甚至停产。工业发酵中污染杂菌造成的损失是十分惊人的,所以必须认真对待除菌。
1 发酵过程对设备的要求
1.1发酵罐
发酵罐在使用之前,需要进行认真检查,以消除染菌隐患,如搅拌系统转动有无异常;机械密封是否严密:罐内的螺丝是否松动;罐内的管道有无堵塞;夹层或罐内盘管是否泄漏;罐体连接阀门严密度等等。机械密封目前在发酵罐上得到广泛应用,取代了以前搅拌轴采用的填料密封形式,但是由于安装精度不高或选用的机械密封不合适,仍然会由于轴封泄露造成染菌,因此在安装搅拌轴时要注意对中, 为了便于观察罐内发酵情况,在人型发酵罐内一般设置有冲洗视镜的蒸汽管道,但是蒸汽一旦冷凝在管道中,冷凝水并不能完全保证无菌,因此冲洗视镜的蒸汽管道要去除,杜绝染菌隐患。如果罐内雾气大看小清楚,可以采用更高亮度的视镜灯[6]。
1.2发酵罐附属设备
发酵罐附属设备有空气净化系统,温度、压力流量等控制系统及相应的管道阀门。哪一个环节出问题都会造成发酵失败[3]。
1.2.1空气净化系统
传统的空气净化使用活性炭、棉花、超细玻璃纤维纸做过滤器Ul,过滤效果差,操作复杂。目前国内的膜过滤技术比较成熟,用偏二氟乙烯((PVDF)制成的折叠微孔滤膜滤芯,过滤精度高,流量大。使用时只要注意过滤器前压缩空气除湿脱油,并按规范对过滤器灭菌,空气保证无菌还足没有问题的。而且PVDF膜对压缩空气中的水分不敏感,膜本身的疏水性强,使用中注意过滤器排水,解决了以前当空气湿度过大导致棉花过滤器不能使用的问题[3]。
1.2.2温度、压力流量等控制系统
发酵罐实消是对发酵培养基进行彻底的灭菌处理,利用高温过饱和蒸汽的强穿透能力使各种细菌、真菌蛋白质凝固而死亡。在工业灭菌中,对预热时间、蒸汽阀门的开度、灭菌温度、灭菌压力和泡沫控制等,都有严格要求,一个环节出现问题,就容易导致染菌。一般工业上灭菌温度在1100C,灭菌压力O.SMPa以上,而保证灭菌温度和压力准确的就是各种温度探头、压力传感器。因此定期对这类探头、传感器、电极的检定十分重要[3]。
1.2.3阀门
阀门对介质的密封性可分为4级[3],公称级、低漏级、蒸汽级和原子级。公称级与低漏级密封适用于关闭要求不严密的阀门,例如用于控制流量的阀门。蒸汽级密封适用于蒸汽和大部分其他工业用阀门的阀座、阀杆和阀体连接部的密封。原子级密封适用于介质密封性要求极高的场合,如宇宙飞船和原子能动力设备等。发酵工业中由于使用高温蒸汽对发酵设备进行灭菌,因此阀门要求是蒸汽级密封。阀门在发酵设备中使用最多,用的阀门也有各种型号,考虑到阀门使用范围和易于维护,发酵工业上使用最多的是截止阀。近年来国内已开发发酵专用阀门,效果较为理想,如条件许可,也可选用。
2 发酵过程对空气的要求
采用空气净化设备系统制备无菌空气,要严格控制好下述两点:一是提高空气进入压缩机之前的洁净度,二是除尽压缩空气中夹带的油水。否则会影响无菌空气质量[1]。
2.1空气过滤器
工业用的空气除菌系统中的空气过滤器一般都比较庞大,如果其中的纤维铺设不匀,密的部分阻力大,松的部分阻力小,就会使较多的空气沿着阻力小的部分流出,从而形成短路。走短路的那部分空气没有经过充分过滤而带菌,进入发酵罐将使发酵染菌。纤维层装得太松对过滤不利,太紧同样也会影响过滤效率。同时,在过滤介质用蒸汽灭菌时,太紧则蒸汽穿透力差,穿透力差灭菌效果也差。所以用过分压实纤维层的办法试图达到增加过滤效率的目的,实际上是适得其反。对于棉花过滤器最合适的充填密度是160 180公斤/米3;玻璃纤维是130 180公斤/米3左右。在铺纤维时分层均匀铺设是必要的。
过滤器器壁腐蚀形成氧化铁层,氧化铁是一种多孔物质,空气会在其中穿过而得不到过滤,因而也会使空气中带茵并造成污染。
采用活性炭棉花作为过滤介质的空气过滤器,活性炭受到气流的冲击互相碰撞、摩擦而破碎并逐渐灰化,使活性炭的体积减小空间增大,上下两端的棉花受空气的顶撞力而逐渐改变位置。之后,灰
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