GB/T 12661-1990纸和纸板菌落总数的测定法.pdf

中华人民共和国国家标准 纸和纸板菌落总数的测定法 GB/T 12661一90 Paperandboard-Determinationofmicrobiological properties-Totalbacterialcount 本标准参照采用国际标准ISO8784八-1987《纸和纸板— 微生物性质的测定方法— 第一部分： 细菌总数》。 主题内容与适用范围 本标准规定了纸和纸板内部和表面菌落总数的测定方法。 本标准适用于除植物羊皮纸或具有湿强度之外的大多数纸和纸板。 2 引用标准 GB450 纸和纸板试样的采取 3 术语 菌落总数：纸和纸板按规定的条件保温培养后，在标准的培养基中形成的细菌菌落总数。 4 原理 将纸或纸板碎解后的悬浮液按规定的稀释浓度在指定的培养基上制备成平板。在30℃有氧环境下 培养72h，按选择的平板和稀释因子计算每克样品的菌落总数。 5 器材 5.1 天平：感量0.1ga 5.2 放大镜：放大倍数 lox或 15X，作平板菌落计数用。 5.3 锥形瓶：容量500mLo 5.4 玻璃珠：直径5mmo 5.5保温箱：温度可以控制在30士VC. 5.6 pH计或6.4-8.0精密pH试纸。 5.7 高压灭菌锅：可以在 120℃和 100kPa的条件下操作。 5.8 烘箱：可以在 165士2C时持续工作3ho 5.9 酒精灯。 5.10刀或剪刀 灭（菌）：用来切纸或纸板。 5.11镊子 灭（菌）：用来夹住纸或纸板的样品。 5.12 牛皮纸信封：230mmX300mm和160mmX240mm的信封各一个，小的放在大的里面。信封用 高定量的牛皮纸做成，使其能够经受在烘箱中灭菌，不会过分变脆或产生有害的副产物。灭菌后，在信封 一端用压敏胶带纸封口。 国家技术监督局1990一12一28批准 1991一10一01实施 GB/T 12661一90 5.13 牛皮纸：高定量牛皮纸。 5.14 锥形瓶：容积300mL。用非脱脂棉的塞子。 5.15 培养皿：规格为100mmX15mm, 5.16 注射器：校准过的10mL医用注射器。或用 10mL移液管，其放液端开 口3mm，以便吸取纤维悬 浮液。灭菌之前，全部移液管的末端大 口用棉花塞住，将注射器或移液管放入金属盒或牛皮纸袋内进行 灭菌。 6 试剂 6.1 乙醇：浓度为75oo(m/m)o 6.2 塞子：非脱脂棉或一次性使用的塞子。 6.3 培养基：胰蛋白陈葡萄糖抽提物琼脂，其组成见附录AAlo 如果没有胰蛋白陈葡萄糖抽提物琼脂，可以用平板计数琼脂或其他适宜的培养基来代替。使用代替 的营养琼脂应在试验报告中说明。 6.4 稀释液：林格氏溶液 R（ingerssolution)。其组成见附录AA2。也可以用其他的等渗溶液，但应在试 验报告中加以说明，同一试验中不能使用不同的稀释液。 7 仪器和培养基的灭菌 根据器材选用灭菌方法。 湿热灭菌 高（压灭菌锅） 以下各项在 1200C,100kPa下灭菌20min; a ： 锥形瓶 5（.3)内装玻璃珠 5（.4)和稀释液 6（.4); b 培养基 6（.3)a 了．2 干热灭菌 以下各项在 165士2C下，灭菌3ho a·牛皮纸信封 5（.12)、牛皮纸 5（.13)； b． 培养皿 5（.15)； 注射器或移液管。 加热前，注射器和移液管应完全干燥。信封或牛皮纸加热灭菌时，必须避免烧焦。 了．3 燃烧 剪刀、镊子、刀具及类似的器具使用前用75％(m/m）乙醇(6.0浸泡，需要剪切纸样时，从酒精中取 出，淌流片刻，然后燃掉器具上剩余的酒精。 8 试样的采取和制备 8.1 按照GB450规定取样，并作如下补充。 8.2 卫生巾、高级卫生纸、普通卫生纸等均以包装好的一包或一卷为单位取样。 平板和卷筒包装的纸或纸板取样时，从每单位样品中弃去纸或纸板顶部几层，以除去污染的表面。 然后用无菌刀沿平行于纸轴或平板纸的一边平行切两刀，再垂直切一刀，可为几层纸的厚度，切下矩形 样品去掉上层纸页。小心地将无菌信封打开，将纸和纸板样品从垂直