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乳腺腺泡模型及其形成机理 齐帮若，李庆章 东北农业大学乳品科学教育部重点实验室，黑龙江 哈尔滨 150030 E-mail ：qibangruio@126.com 摘 要：为了有效简化乳腺发育和泌乳功能的研究过程，在体外分离培养乳腺上皮细胞的基 础上, 为建立乳腺腺泡模型进行了深入研究。本文就乳腺腺泡模型的建立及其形成机理的最 新成果作以综述。 关键词：乳腺；腺泡模型；机理 1 引言 乳腺上皮细胞在发育成熟时，其细胞的增殖和分化同时进行。将小鼠乳腺上皮细胞在 EHS基质上培养时，有极性的上皮细胞会围成腔状结构形成腺泡。在腺泡行程过程中，粘连 蛋白、糖皮质激素、催乳素、表皮生长因子、胰岛素、胰岛素样生长因子结合蛋白等，都起 着重要的调节作用[1] 。 2 乳腺腺泡的形成过程 体外培养形成的腺泡是由单层的上皮细胞合围而成。将乳腺上皮细胞在EHS基质上培养 时，细胞团内部细胞通过凋亡和自噬作用最终形成腔状结构的腺泡[2] 。将乳腺上皮细胞在 EHS基质上培养 4 日时，用DAPI和钙黄绿素共染，显微镜观察发现内层细胞死亡，形成具 有极性的腺泡结构[3] 。这种腺泡结构的保持，来自于细胞和基质之间以及细胞和细胞之间的 相互作用。如果去除胶原受体和α2β1 整合蛋白，细胞就不能结合到基质上，从而导致腺泡 不能形成[4] 。细胞和细胞之间主要通β4 整合蛋白在半桥粒的中介作用，形成复合体而保持紧 密连接。 3 糖皮质激素对腺泡形成的作用 在乳腺腺泡模型中，糖皮质激素通过降低紧密连接的细胞间重组作用和抑制薄壁细胞的 渗透性来保持腺泡的结构。同时糖皮质激素通过对JNK 、MAPK 的激活和抑制，来控制腺泡 的形成过程。用JNK信号通路抑制剂SP600125处理能引起同样作用，在存在JNK特殊抑制剂 SP600125情况下形成的腺泡，不能形成腔状结构，没能表达具有极性的F肌动蛋白、细胞连 接蛋白AP1 、E-钙粘蛋白、β酪蛋白、β4整合蛋白和腺泡连接紧密蛋白ZO1 。糖皮质激素受体 抑制剂RU486也有同样作用，说明腺泡的形成依赖于糖皮质激素对JNK信号的激活作 用。 形成的腺泡表达GADD45、MEKK4 ，糖皮质激素激活GADD45 －MEKK4复合体的形成， 同时还可以激活c-Jun磷酸化，而c-Jun磷酸化是JNK信号途径的重要步骤，这些结果显示糖 -1- [5] 皮质激素通过对JNK信号途径的调节来控制腺泡的形成过程 。不加糖皮质激素的培养细 胞，细胞之间很少形成连接极化侧面的连环蛋白，基底部粘连蛋白消失[6] 。 p21和腺泡功能有着密切关系，糖皮质激素对p21RNA转录和表达也起着重要作用，在 培养4 日的腺泡里p2 1表达显著。缺少糖皮质激素也将导致AP1和核转录因子kb不能表达，说 明糖皮质激素间接地控制细胞周期蛋白。腺泡连接紧密蛋白ZO1和ZO3 ，也是由糖皮质激素 决定的，可以说腺泡结构的形成和转录因子相互关联[7] 。 糖皮质激素在腺泡中可激活GADD45表达以及GADD45β表达和激活JNK信号途径。 GADD45和JNK途径的激活，可以诱发细胞凋亡。GADD45 同多种细胞蛋白包括MAPK激酶、 MEPKK4等激酶相关联。GADD45mRNA也呈现糖皮质激素依赖性分泌。 JNK途径激活是通过MAPK激酶实现的，它的激活存在MEKK4 的自我抑制，是一种 GADD45β－MEKK4复合体形式[8] 。MEKK4在腺泡形成的第2 日开始表达，GADD45β－ MEKK4复合体在糖皮质激素培养的腺泡中第2 日可以检测到，这种复合体在单层培养的细胞 中检测不到。 β4整合蛋白的表达是通过JNK信号通路调节的，有资料显示β4整合蛋白对腺泡形成起至 关重要的作用，它可能是糖皮质激素和JNK调节的下游目标[9-10] 。在用RU486处理的腺泡中 没有