原生质体融合技术及其在嗜酸乳杆菌菌种选育中的应用.pdfVIP

安徽农学通报 ，AnhuiAgi．Sci．Bul1．2009，15(7) 原生质体融合技术及其在嗜酸乳杆菌菌种选育中的应用 竺利红 许 豪 (1浙江省农业科学院植物保护与微生物所，浙江杭州 310021；2杭州市拱墅区农业局 ．浙江杭州 310015) 摘 要：嗜酸乳杆菌是 目前乳酸茵家族中极为重视研究与开发的益生茵之一，优质嗜酸乳杆菌对于其产品的产量、质 量、生产效率等方面都有决定性的作用。本文论述了一种新兴的嗜酸乳杆菌育种技术——原生质体融合技术的原理 及在嗜酸乳杆菌菌种选育中的应用和发展方向。 关键词 ：嗜酸乳杆菌；原生质体融合 ；菌种选育 中图分类号 Q932 文献标识码 A 文章编号 1007—7731(2009)07—64—02 ApplicationofProtoplastFusionTechnologyintheBreeedingofLactobacillusacidlophilus ZhuLihongeta1． (1InstituteofPlantProtectionandMicrobiology，ZhejiangAcademyofAgriculturalSciences，Hangzhou 310021，China) Abstract：LactobacillusacidopholusisoneofprobiotieswhichareresearchedanddevelopedintheLacticacidbacterium at present．TheoutstandingL acidopholusisofgreatimportnaceastoitsquantity．productiveefficiencyandSOon．Thisre— view demonstratestheprinciple，applicationanddevelopmentorientationofprotoplastfusiontechnoloyg inthebreedingofL acidopholus． Keywords：Lactobacillusacidopholus；protoplastfusion；breeding 嗜酸乳杆菌 (Lactobacillus．acidopholus)是 目前乳酸菌 术具有杂交频率较高、受接合型或致育型的限制较小和遗 家族中极为重视研究与开发的益生菌之一，被视为第三代 传物质更为完整，并且存在着两株以上亲株同时参与融合 酸乳发酵剂菌种 ，只有当其在发酵产 品达到一定数量级 形成融合子的可能性等优点，提高菌株产量和品质 的潜力 (10。CFU／mL或 10。CFU／g)时才能对人和动物起到健康 较大。 促进效果…。因此，嗜酸乳杆菌菌株的稳定性及其发酵性 2 原生质体融合技术的原理 能等直接影响发酵产品的质量 ，同时也决定着发酵工艺流 微生物原生质体融合技术的整个过程包括 ：原生质 程和运转周期及运转费用。因此，选育优良的嗜酸乳杆菌 体的制备、原生质体的融合和原生质体的再生。 菌种在发酵工业中具有重要 的意义。传统的对嗜酸乳杆 2．1 原生质体的制备与再生 菌的选育方法主要有 自然分离和诱变育种。近年来重组 2．1．1 原生质体 的制备 制备原生质体 即去除细胞壁 ， DNA技术 ，基因工程和原生质体融合技术迅速发展，得到 形成裸露的原生质体 ，是原生质体技术的前提和基础 。不 了广泛应用。本文重点对原生质体融合技术的原理及其 同微生物的细胞壁组成各不相同，所以制备其原生质体的 在嗜酸乳杆菌菌种选育中的应用进展及前景做一概述。 最佳条件也存在着很大差异。 目前原生质体的制备主要 l 原生质体融合技术的发展 采用生物酶法 。不同的菌种应用不同的酶 ，例如，放线 原生质体融合(Pmtoplastfusion，简称 PF)技术又称细 菌和细菌多用溶菌酶