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有机污染物对绿藻急性毒性的研究进展 郭小玲 河海大学环境科学与工程学院，江苏 南京，（210098） E-mail: Guoll683@163.com 摘 要：近年来，有机物的品种日益增多，使用量逐年增加。很多残留于环境，对生物生 长及人体健康都造成了影响。有机物对绿藻急性毒性的研究具有重要意义，但相关研究还 比较分散。综述了近年国内外藻类急性毒性的研究成果，介绍了常用的实验测定方法包括 细胞计数法、叶绿素 a 含量测定；四种主要的数据处理法包括生长速率法、概率单位法、 面积法和相对数量法。此外，还论述了光照、温度等对毒性测定的影响及反应性和非反应 性两种毒性机理。最后，对藻类毒性未来研究方向进行了展望。 关键词：有机污染物，绿藻，急性毒性。 1. 引言 近年来随着生产的发展，合成有机物的品种、数量日益增多，每年有上千种新化学品 问世。大多数有机物都有毒甚至会产生三致作用，对生物生存和人类健康构成危害。许多 化学物质残留于生态系统，水体是化学品进入环境后的重要归宿地，目前我国大部分水体 都不同程度地受到有机污染物的污染。绿藻作为水生态系统的主要初级生产者，对于维持 生态系统的平衡起着重要作用。藻类个体小，对毒物敏感，是良好的测试生物。因此，研 究有机污染物对绿藻的急性毒性具有重要的现实意义。 2. 毒性实验方法研究 2.1 测定方法 藻类毒性实验常用的测定方法有：细胞计数法、叶绿素 a 含量测定。 细胞计数法分为直接计数法和比色法。用显微镜、计数板可以直接计数。为减少毒物 引起细胞形态等改变造成的误差，直接计数时应采用同一标准，如：细胞尚未完全分裂时 均按一个计。比色法是先根据测定的光密度和细胞数做标准曲线，再由测量的光密度从标 准曲线上读出相应细胞数。细胞数法简便，重现性好，应用普遍。 藻类都含有叶绿素 a，通过测定其含量可估算出藻类的生长。测定方法主要有荧光法 和比色法两种。比色法是在不同波长处分别测定酸化前后的光密度进行计算，应用较普 遍。荧光法需先测定荧光值和光密度做回归曲线，利用测得光密度及回归曲线求叶绿素 a 含量。叶绿素 a 含量测定简单快捷，但测定值易受环境等影响。 -1- 此外，蛋白质含量、超氧物歧化酶（SOD ）活性等也被选做毒性实验的指标。如：研 究五氯酚对斜生栅列藻的毒性，用卡马斯亮蓝G-250 染色法测定了藻的蛋白质含量，发现 可溶性蛋白质含量随毒物浓度下降而下降[1] 。熊丽等则用Folin-酚法测定了藻类的蛋白质含 量，发现可溶性蛋白含量变化与其生长变化一致，并用NBT光还原反应法测定了其SOD活 [2] 性，发现SOD活性变化比其生长变化等超前 。 2.2 藻细胞的观察 很多实验表明：有机污染物不但会抑制藻类生长，对细胞形态结构及分裂等均有影 响。如：藻细胞坏死残骸数量随五氯酚浓度增加而增多，细胞颜色逐渐由翠绿色变成淡黄 色甚至接近白色[1] 。低浓度单甲脒作用时，藻生长正常，色素体明显，色鲜绿；较高浓度 时，栅藻细胞变小、细，呈三角形等不规则形，色素体模糊，颜色变为淡绿；很高浓度 时，为小的变形细胞[3] 。斜生栅藻在不同浓度药液中, 出现细胞体积缩小, 形态变化, 呈 [4] 菱形、球形和不规则形, 颜色变淡, 四联体细胞解体成单细胞而崩解消失 。 3. 数据处理方法 当前，藻类毒性实验常用的数据处理方法有：生长速率法、面积法、概率单位法以及 相对数量法。 3.1 生长速率法 藻类生长曲线呈指数型，可以根据比生长速率、生长阻碍率求抑制率为 50%时的相应 浓度EC50 。 [5] ：µ （/天）=ln(X /X )/(t -t )