乳鼠成纤维细胞在人血清中的存活与增殖的研究.pdfVIP

《中国医学创新》第11卷第31期(总第313期)20i4~11月 基础萄干究 Jichuyanjiu 乳鼠成纤维细胞在人血清中的存活与增殖的 研究 肖扬① 李裕舒② 董平栓① 【摘要 】 目的：本研究旨在证明人血清直接培养乳鼠成纤维细胞是可行的。方法：将乳鼠成纤维细胞分别 在胎牛血清及人血清中培养，通过在显微镜下观察成纤维细胞形态及密度，同时用MTT比色法检测吸光度来 对 比成纤维细胞在胎牛血清及人血清中的增殖活性。结果：两种实验方法均显示：两组成纤维细胞在第一天的 增殖活性无显著性差异，第四天人血清组的成纤维细胞增殖明显 比胎牛血清组活跃。结论：乳鼠成纤维细胞在 人血清中不仅可以存活，而且有增殖行为。 【关键词】成纤维细胞； 人血清 ObservationonSurvivingandProliferationofNeonatalRatFibroblastsinHumanSerum ／XIAO Yang，LI Yu-shu。DONGPing-shuan．／／MedicalInnovationofChina。2014，11(31)：015-017 【Abstract】Objective：Toprovethathumanserumdirectlyisfeasibletocultureratfibroblasts．Method：Rat fibroblastswereculturedinserum andfetalbovineserum ，byobservingthemorphologyanddensityoffibersunder amicroscope，andwiththeMTTratiotesttocomparetheabsorbanceofcellsintoproliferativeactivityinserum and fetalbovineserum．Result：Therewasnosignificantdifferencebetweentwogroupsinthefirstday；butthefibroblas．t’s proliferationrateinhumanserunlwashigherthaninfetalbovineserum．Conclusion：NeonatM ratfibroblastsinhuman seurm canSurviveandproliferateinhumanserum． 【Keywords】Fibroblast； AlbuminHuman First-author’Saddress：TheFirstAffi liatedHospiatlofHe’nanUniversityofScienceandTechnology， Luoyang471003，China doi：10．39696．issn．1674—4985．2014．31．005 成纤维细胞是结缔组织中常见的细胞 ，由胚胎时 生产 )；倒置显微镜 (Olympus公司生产 ，型号 IX74 期的间充质细胞分化而来 ，细胞扁平，多突起，呈梭 TH4—200)；酶标仪 (BIO—TEK公司生产，型号ELX 形 、三角形 、不规则形，它参与人体的纤维化过程。 800o实验分组：选择胎牛血清组为对照组 ；选择正 过度纤维化会导致器官形态及功能的异常，心脏的纤 常人 15例为实验组，年龄 (57．0-I：1．3)岁。 维化可导致心脏扩大、心衰、心律失常等Ⅲ，因此心 1．2 方法 脏纤维化是 目前心脏研究的热点。研究过程中常会用 1．2．1 实验材料处理方法 到成纤维细胞，但限于成纤维细胞的取材限制，常用 1．2．1．1 实验血清处理方法及原代培养液制备 将无 实验动物的细胞，多用动物血清培养 l2]，但用人血清 菌促凝管中抽取的成人动脉血，置于4cC温度下 1h， 直接培养的却很少 。本研究 旨在证明人血清直接培养 待血液凝固后，离心 (3000转 ／r¨in)i0min,取上清 乳 鼠心脏成纤维细胞的可行性，为成纤维细胞在人体 置于离心管中，实验用的胎牛血清从试剂公司购回， 中的增殖研究提供依据。 在无菌超净台中将其分装至无菌小瓶 中看 ，置于一20 1 资料与方法 ℃冰箱中冻存备用。每次使用时将其置于室温下完全 1．1 一 般 资料 乳 鼠 (SD大 鼠 )；胰 酶 l：250 溶解 即可使用。将处理好的人或胎牛血清加入达尔 (Amresco公司生产