气相色谱定性与色谱柱效的测定.pptVIP

实验五 气相色谱定性 和色谱柱效的测定 相对保留值r21 分离度R 保留值定性 加入已知纯物质增加峰高法 三、实验条件 SP-6800A型气相色谱仪，热导池检测器（TCD）; 不锈钢填充柱：1米长，内径3毫米，内装GDX-103 (80～100目)； 1微升微量进样器，氢气（钢瓶或氢气发生器），皂膜流量计。 试剂：纯净水，无水乙醇，乙酸乙酯，混合试样。 仪器条件：载气（H2）输入压力0.25MPa 柱前压0.06 MPa 汽化室（INJ）温度 150℃，检测室（AUX）温度150℃，色谱柱室（OVEN）温度150℃，桥电流150mA, 衰减001。 四、实验步骤 （一）开机 TCD基本结构及操作演示 1．通载气（H2）至需要压力，检查各连接部分不得漏气，旋下热导放空螺帽。 2．检查气路畅通后，开主机电源，按要求设置各部温度，核对无误后点“加热”，通过点“显示”观察各部升温情况。 3．打开电脑，点鼠标左键双击“在线工作站”图标进入色谱数据工作站，准确进入相应“通道”。点“数据采集”，“查看基线”，“零点校正”，初设“电压范围”为-1～20mV,“时间范围”为0～10min。 4．待各部分温度接近设定值，设桥电流150mA，同时点“桥流”和“衰减”。 5．待基线基本平直，准备进样。 （二）进样分析 1．先用微量进样器取空气0.6～0.8uL,练习进样操作，并记录空气峰保留时间。 2．先后分别取水、乙醇、乙酸乙酯0.1 uL同时取空气0.5～0.6 uL注入仪器，同时启动“数据采集”，待所有组分全部流出并基线平直，“停止采集”，记录空气峰和标样峰的保留时间。每样取三组可用数据，取平均值。 3．取试样0.2 uL加空气0.6 uL左右，注入色谱仪，待各组分全流出并基线平直，“停止采集”，保存数据文件，记录各组分峰的保留时间。取三组可用数据，取平均值。 4．从电脑桌面打开“离线工作站”，编辑并打印分析报告。 （三）测定载气流速 查看载气流路中转子流量计的转子高度，通过转子高度-流量曲线图查的载气流速。 （四）关机 实验结束，将“桥流”设置为“000”，点击“停止”便停止加热，点“显示”观察柱温（OVE）至接近室温（30℃左右），旋上“热导放空”密封螺帽，关掉主机电源开关，停止供气。退出电脑系统。 1．各标样标准保留时间。 2．试样中各组分定性结果及定性依据。 3．乙醇对水的相对保留值。 4．测量乙醇和乙酸乙酯的半峰宽，分别计算其理论塔板数和有效理论塔板数，并进行比较。 计算水-乙醇的分离度。 六、思考题 1、色谱定性的依据是什么？主要方法有哪些？ 2、保留值受哪些因素的影响？如何正确测定保留值。 * 主讲教师 崔庆新 一、目的要求 了解气相色谱仪的基本结构，热导池检测器（TCD）工作原理及操作技术； 学会测定组分的保留时间、保留体积； 计算相对保留值、色谱柱的理论塔板数、有效理论塔板数及相邻组分的分离度。 二、实验原理 色谱法概述 色谱法—混合物最有效的分离、分析方法。 俄国植物学家茨维特在1906年使用的装置： 色谱原型装置，如图。 色谱法是一种分离技术 试样混合物的分离过程 — 试样中各组分两相间不断进行的 分配过程。 其中的一相固定不动 －固定相 另一相是携带试样混合物流过此固定相 的流体（气体或液体），－流动相 色谱法分类 1、按两相状态分 色谱法分类 2、按固定相的固定形式分类 色谱法 柱色谱 纸色谱 薄层色谱 色谱法分类 3、根据应用领域不同分 色 谱 制备色谱 半制备色谱 色谱分析 气相色谱 流动相为气体的色谱。气体流动相又称为载气 分离分析对象：气体或易挥发热稳定性高的液体、固体 常用检测器：热导池检测器（TCD) 氢火焰离子化检测器（FID) 电子捕获检测器（ECD） 火焰光度检测器（FPD) 色谱基本概念 色谱图 被分析试样从进样开始经色谱柱分离，到各组分全部流过检测器 在此期间所记录下来的响应信号随时间而变化的曲线（分布的图像），称为试样的色谱流出曲线或色谱。 色谱基本概念 flash 组分2与组分1调整保留值之比： r21 = t′R2 / t′R1= V′R2 / V′R1 理论塔板数： 有效理论塔板数： 相邻两组分的分离度R，等于这两个组分保留时间之差与它们的峰宽之和一半的比值。 R=0.8：两峰的分离程度可达