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川楝黄酮分离与结构研究1 杨海艳，宋先亮 北京林业大学材料科学与技术学院，北京（100083 ） E-mail: yhaiyan630@126.com 摘 要：本文研究了用60% 乙醇提取川楝黄酮，经萃取分离，聚酰胺层析柱纯化，用TLC法、 颜色反应和紫外分光光度仪分析其黄酮成分。研究结果表明，川楝黄酮中含有两个黄酮醇类 化合物，活性测试表明当浓度达到0.5g/L时，化合物Ⅰ对O2-·的清除率达为69.57% ，对·0H的 清除率为74.19%；化合物Ⅱ对O2-·的清除率为65.22% ，对·0H的清除率为73.12%。结果表明 两个黄酮类化合物具有较高的抗氧化活性。 关键词：川楝、黄酮、结构研究 楝科植物川楝（Melia toosendan Sieb.et Zucc.），又名金铃子，产于亚洲热带及亚热带地 区，在我国主要产于四川、贵州、湖南、湖北等地。川楝含有川楝素、生物碱、山柰醇、树 脂、鞣质等活性成分，在医学上的应用始载于《神农本草经》，其具有疏肝、止痛、驱虫等 功效。其果实类球形，直径 2～3cm，具深棕色小点，气特异，味酸、苦，主要药用成分为 川楝子素、生物碱等，用于胸胁、脘腹胀痛、疝痛、虫积腹痛等症。此外，川楝子还被常用 来治疗乳腺炎、乳腺增生等乳腺病。 黄酮类化合物的药用价值很高，具有强化免疫系统调节免疫功能、吸收活性自由基、具 有抗癌、抗自由基氧化、抗衰老、抗病源微生物、抗炎症、抗感染、抗溃疡、抗痉挛、抗辐 射、抗肿瘤、改善血液循环状态、促进组织再生、调节内分泌、减少黑色素生成、消除黄褐 斑等多种功能[1，2] 。研究发现，川楝总黄酮提取物具有较高的抗氧化活性，而其具体结构不 清楚，本文对川楝总黄酮提取物进行分离，确定其结构[3]，有利于川楝的开发利用。 1. 实验部分 1.1 原料 川楝子，采于四川省宜宾市林业局 1.2 仪器与主要试剂 紫外分光光度计、硅胶板（50×100mm ）、芦丁、无水乙醇、甲醇、甲醇钠、氯仿、石 油醚Ⅱ （60-90 ）、乙醚、乙酸乙酯、正丁醇、冰醋酸、三氯化铝、氢氧化钠、盐酸、醋酸 钠、硼酸、镁粉、锌粉、聚酰胺（60-90 ），试剂均为国产分析纯。 1.3 黄酮类化合物的提取 川楝子去核,用体积浓度60%的乙醇,料液比1：20 ，70℃水浴提取1h，提取两次，合并提 取液减压浓缩至膏状，加热水溶解浸膏，依次用石油醚萃取三次、乙醚萃取三次、乙酸乙酯 萃取五次、正丁醇萃取三次，回收萃取剂。取正丁醇萃取物反复柱层析，层析柱为5cm×30cm 开口柱，用梯度乙醇洗脱，收集洗脱液浓缩结晶得两种化合物。 1.4 结构鉴定 1.4.1 TLC分析 1本课题得到北京林业大学大学生科研培训计划（200705010 ）的资助。 - 1 - 以正丁醇：冰醋酸：水=4 ：1：5作为展开剂，用硅胶板进行薄层层析，记录斑点紫外显 色反应，计算Rf值。 1.4.2 颜色反应 样品溶液与HCl-Zn 、HCl-Mg 、10%NaOH、AlCl 、MgAc 、H S0 6种颜色反应试剂反应 3 2 2 4 后在可见光和紫外光下观察其颜色变化。 1.4.3 紫外光谱分析 用甲醇将样品溶解，在紫外分光光度计上于190-600nm范围分别测定“ 甲醇”谱图、“ 甲醇 钠”谱图、“AlCl ”谱图、“AlCl /HCl”谱图、“NaAc”谱图、“NaAc/H BO ”谱图。 3 3 3 3 1.5 抗氧化活性的测定 1.5.1对超氧阴离子自由基（O2-· ）的清除