线粒体DNA的提取方法.pptVIP

* * 线粒体DNA的提取方法 Protocol for Extracting Mitochondria DNA protocol 从植物组织提取高纯度线粒体DNA 实验目的 1、4000rpm 离心可以沉淀分离出叶绿体、细胞核和组织碎片，12, 000 rpm离心才可沉淀分离线粒体。 实验原理 3、SDS可以从植物各样组织类型中释放和结合的细胞核酸。 2、用蔗糖浓度梯度纯化线粒体，不同浓度蔗糖的缓冲液因比重不同而分层。 研钵和研杵；冷冻离心机；过滤装置（漏斗，玻棒）pH计；移液器；水浴箱；50mL离心管；2；1.5 mL离心管。 Apparatus: 仪器设备： mortar (cold); Centrifuged; filter; pH meter; water bath boiler; 50mL centrifugal tube; eppendorf tube . 试剂： Reagent and solution A buffer: 10 mmol/L Tris-HCL，pH 7.4；500 mmol/L；20 mmol/LEDTA；0.2%BSA；0.2%β-mercaptoethanol B buffer: 10 mmol/L Tris-HCL ，pH 7.4；600 mmol/L sucrose; 20 mmol/L