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老鼠粪便中粪固醇的检测 徐扬 吉林大学生命科学学院，长春（130012 ） Email ：liuran0211@163.com 摘 要：本文介绍了一种气相色谱/质谱选择离子模式（GC/MS-SIM)检测老鼠粪便中粪固醇 的方法。在老鼠粪便中已检测出粪醇、差向异构-粪醇、胆固醇、24- 乙基-粪醇等。结果表 明，这些粪固醇可以作为老鼠粪便污染的指示物。 关键词：老鼠，粪便，粪固醇，指示物 中图分类号：X502 文献标识码：A 1. 引言 科学家早已发现，β-甾烷醇可以较好地鉴别各种动物的粪便来源。因而，很多研究已将 这些生物标志物作为动物污染的指示物。 5β- 甾烷醇是一类典型的甾族类生物标志物，通常是由较高等动物肠中大肠杆菌作为触 媒，将胆固醇（胆甾-5-烯-3β-醇）及其高分子同系物 24- 甲基-胆固醇（24- 甲基-胆甾-5-烯-3β- 醇）、24-乙基-胆固醇（24-乙基-胆甾-5-烯-3β-醇）、24-乙基-胆甾-5，22-二烯-3β-醇等，经△5 双键氢化还原转化而形成的一系列甾族类化合物。上述生物加氢化反应，只形成 5β-氢异构 [1 ，2] 体，不能形成 5α-氢异构体。5α-氢异构体，只有在需氧菌参与时才能形成 。 胆固醇转化为粪醇（5β-胆甾-3β-醇），通常需要经历C-3 位上羟基的一系列氧化过程， 如形成胆甾-5-烯-3-酮、胆甾-4-烯-3-酮、5β-胆甾-3-酮等中间体[3-5] ；形成的粪醇（5β-胆甾-3β- 醇），是人粪便中主要的 5β-甾烷醇，约占总固醇的60% [6] ；在其它动物粪便中这种 5β- C27 甾烷醇含量较低；草食动物（如牛、羊等），因喂养富含C28 菜油固醇和C29 谷甾醇饵料， 粪便中 5β-C28 甾烷醇和 5β-C29 甾烷醇的含量较高，如24- 甲基-5β-胆甾-3β-醇、24-乙基-5β- 胆甾-3β-醇；狗和鸟类粪便中很少含有 5β-胆甾-3β-醇[7] ；而狗粪便中富含胆固醇，鸟类粪便 中却富含胆固醇和谷甾醇。用微生物学指标（如：耐热大肠杆菌thermotolerant coliform等） [8] 不能鉴别狗和鸟类等粪便污染的来源 。 5β- 甾烷醇及其比值指标，已被应用于各种污染指示物的研究中[9-13] 。Bethell等用5β-胆 甾-3β-醇/24- 乙基-5β-胆甾-3β-醇的比值指标作为污染指数，较好地区分了人类粪便与草食动 物（如牛和羊）粪便的来源[14,15] 。Leeming R等用5β-胆甾-3β-醇/ （5β-胆甾-3β-醇+24- 乙基-5β- [16] 胆甾-3β-醇）的比值指标，指示了不同来源的粪便污染状况 。 目前，尚未见到有关老鼠粪便中粪甾醇测定的研究报道。鉴于此，本文应用毛细管 GC/MS-SIM检测老鼠粪便中的粪甾醇，旨在为我国生态监测方法提供基础资料。 2. 材料和方法 2.1 样品来源 在野外诱捕野生老鼠一只，放入干净木盒中，待老鼠排出粪便后，及时收集新鲜粪便， 置于烧杯中，阴干后，转移到棕色玻璃瓶中，密封，于冰箱中冷冻保存，待处理。 2.2 仪器与试剂 2.2.1 仪器 -1- Agilent 6890/5973N 气相色谱-质谱联用仪，毛细管柱（HP-5 ，30m×0.25mm×0.25μm ）， ZFA—型旋转蒸发装置，ULTRA TURRAX ZKA T18 basic 匀浆机，