高温胁迫下草坪草高羊茅差异表达基因de分子研究【精选文档】.pdfVIP

天津农业科学 n AgricuhuralSciences 2015，21(1)：1-5 ·植物生理与生物技术 高同皿温胁，训’迫一]下l’草坪草高羊茅差异表达基因的分子研究 李 卉 ，王 艳 z，王海宏，，梁珂珂 ，李建龙 (1．南京大学 生命科学学院，江苏 南京 210046；2．中国科学院成都生物研究所 ，四川 成都 610041；3．南京交通职业技术学院，江苏 南 京 211188；4．南京农业大学 草业学院，江苏 南京 210095) 摘 要：通过构建高羊茅高温胁迫下的消减文库，并使用斑点印迹技术从中筛选出差异表达基因，以期深入研究高羊茅适应高 温的分子机制。以冷季型草坪草高羊茅为研究对象，在两年生理指标测定的基础上通过构建高羊茅在高温胁迫下的SSH文库， 分别以正、反向SSH探针与尼龙膜上的消减 cDNA质粒进行杂交，并经相应的显色反应得到杂交信号，比较了38／30。c(昼／夜) 的培养箱中高温胁迫 6h的高羊茅叶片和对照组高羊茅叶片的RNA差异。结果表明：试验得到的差减文库中大量组成型表达 基 因已经被有效去除，使某些特有的差异基因得到了富集 ；利用斑点杂交共得到252个差异片段，库中阳性克隆约 占50％以 上；阳性克