高特异性PCR方法鉴别乌梢蛇及其混淆品.pdfVIP

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高特异性PCR方法鉴别乌梢蛇及其混淆品.pdf

·论 著· 高特异性PCR方法鉴别乌梢蛇及其混淆品 100061;3.中国药品生物制品检定所,北京100050) 摘要:目的建立一种简便、准确的鸟梢蛇药材DNA分子标记鉴别方法。方法根据鸟梢蛇及10种常见混淆品线粒体12S 利用此方法鉴别从市场上购买的各种鸟梢蛇药材。结果PCR结果是在65℃复性温度下,正品鸟梢蛇得到约320bo的扩增 带,而混淆品在同样的条件下无扩增带。为检验该方法的准确性,对市售鸟梢蛇炮制品随机选取13块进行PCR鉴别验证,其 中正品9块,混淆品4块,检出率达100%。结论所设计的鉴别引物对正品乌梢蛇有高度的特异性。PCR方法稳定性高,同 种不同个体间的种内差异对鉴定结果无影响。本方法简单、准确、快速、灵敏度高、重现性好。 关键词:鸟梢蛇;高特异性;PCR鉴别 中图分类号:R284 文献标识码:A 文章编号:1001—2494(2007)05—0333—04 of dhumnadesandIts PCRIdentification Adulterants HighSpecific Zaocys TANG Ji3 Xiao-jin91,FENGCheng—qian91,HUANGLu—qil+,QIANZhong—zhi2,CUI ChineseMateria ChineseMedcal ChinaPhar- (1.Instituteof Medica,Chinaof Academy Sciences,Belting100700,China;2.Committeeof theControl and ofPharmaceutical macopeia,Beijing100601,China;3.NationalInstitutefor Biological for To aconvenientandeffectivemethodtheidentificationof ABSTRACT:OBJECTIVE Zaocys develop its Basedonthe ofmitochondrial12SrRNA of dhumnadesand snake).METHODS genefragment adulterants,a sequence Zaocys of and for dhumnadesfromother ofsnake.A pairhighlyspecific HWH-1)weredesigneddistinguishingZaocys species primer(HWL-l were tO from PCRreactioncondi

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