产耐盐蛋白酶深海细菌的分离鉴定.pdfVIP

现代食品科技 ModernFoodScienceandTechnology 2015，Vo1．31，No．3 产耐盐蛋白酶深海细菌的分离鉴定 赵谋明，舒会 ，崔春，雷芬芬，唐雪鹭 (华南理工大学轻工与食品学院，广东广州 510640) 摘要：本文采用高盐富集、复筛发酵及耐盐稳定性实验的方式，从深海海泥中筛选产耐盐蛋白酶的深海海洋细菌。从深海海洋 微生物中共筛选出25株耐盐菌，在这25株菌株中有 14株在酪蛋白平板上能产生较大的水解圈；通过发酵复筛及耐盐稳定性实验， 筛选得到一株酶活性能高且耐盐稳定性好的菌株，将其编号为SWJSS3；对菌株SWJSS3进行 16SrDNA的鉴定并初步研究了盐浓度 对产酶情况和酶稳定性的影响。菌株SWJSS3在0--10％ (m／V)的盐浓度条件下均能生长，在0-10％的盐浓度下，菌液OD6oo的吸光 值范围为0．08．1．98；通过发酵复筛其所产生的蛋白酶酶活在盐浓度为 1％时达最高，为233．56~2．16U／mL；所产蛋白酶在终浓度为 15％ ( 的NaC1溶液下，混匀4℃保存 1h，残余酶活为初始酶活的40．70~2．06％，继续存放一段时间到第9h，酶活基本保持不变；通 过 16SrDNA鉴定其为铜绿假单胞菌，与PseudomonasaeruginosaRP2816SrDNA的相似性i到 99％以上。 关键词：深海海洋细菌；蛋白酶；耐盐稳定性；分离鉴定 文章篇号：1673—9078(2015)3—50—54 DOI：10．13982~．mfst．1673．9078．2015．3．009 TheIsolationandIdentificationofDeep—seaBacteriaThatProduce Salt-tolerantProteases ZHAOM ou-ming,SHU Hni,CUIChun，LEIFen-fen，TANG Xue-lu (CollegeofLightIndustryandFoodScience，SouthChinaUniversityofTechnology，Guangzhou510640，China) Abstract：Thisstudywasaimedatscreeningdeep-seabacteriathatproducesalt—tolerantproteasesfrom deep—seamudsamplesbasedOil high—saltaecumulation，fermentationrescreening，andsalt—tolerantstability tests．Twenty—fivestrainsofdeep—seamarinemicroorganismswere selected，14ofwhichdemons~atedanincreaseinhydrolysiscyclesOI1caseinplates．Asrtainwithhi曲 enzymeactivitynadsaltstabiliytwas obtainedbasedonfermenattionrescreeningandasalt-tolerancetest，andwaslabeledasSWJSS3．StrainSWJSS3wasidentifledusing16S rDNAandapreliminarysmdyOntheeffectsofsaltconcentrationOHitsproteaseyieldandstabiliytwasconducted．ThesrtainWaSabletogrow inmediumwithsaltconcenrtationsbetween0％ nad10％ andna OD600ofhtebacterialsuspensionrangingfrom 0．08to1．98．Th eactivityof proteaSesproducedbySWJSS3wasmaximalfora1％ saltconcenrtationinthefermentationrescreeningr233．56士2Um／L)．Aftertre