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孕妇与不孕症妇女解脲支原体、沙眼衣原体感染的研究　 要迎春 一、课题名称：孕妇与不孕症妇女解脲支原体、沙眼衣原体感染的研究 二、立项依据： 解脲支原体（Uu），沙眼衣原体（Ct）感染在临床上非常多见, 已经成为医学界普遍关注的问题. 孕妇和不孕症妇女都是Uu和Ct的易感人群，Uu, Ct是孕妇和不孕症妇女生殖道感染的最常见的两种病原微生物，我们就妊娠期和不孕症患者Uu, Ct感染作出初步研究，研究两者Uu和Ct感染的情况，以便进一步做好围产期保健，提高妊娠质量及查找不孕症患者的病因，便于临床治疗。 　 三、研究方案 1、研究目标： 了解孕妇与不孕症妇女解脲支原体(Uu), 沙眼衣原体(Ct)感染的情况. 方法：孕妇534例和不孕症患者124例分为两组取其宫颈分泌物检测Uu，CtDNA，并抽取空腹血清，采用Uu, Ct蛋白芯片方法检测两组血清中的Uu，Ct IgG抗体，以了解两组患者Uu, Ct感染的情况. 结果：孕妇与不孕症妇女Uu感染率无统计学差异，而Ct感染率则不孕症妇女明显高于孕妇(P0.05). 结论：Ct感染在不孕症的病因中更具意义。 2、研究对象： 1、对象200307/2004 02来我院妇产科和生殖门诊就诊的孕妇534例和不孕症妇女124例（丈夫精液分析正常，多数为继发性不孕患者），检测其血清Uu和Ct IgG抗体及宫颈分泌物Uu和Ct DNA 3、研究的方法 ①用PCR方法检测孕妇及不孕症妇女宫颈分泌物Uu和Ct DNA，其取材方法是：用扩阴器扩开阴道后，取消毒棉拭子，拭净宫颈外口分泌物，弃去. 再取一支棉拭子，伸入宫颈管内，停留30 s，沿管壁旋转3 wk后取出. 放入装有1 mL无菌生理盐水的试管中，充分悬浮，再挤干拭子中的水份，取出拭子，弃去. 试管于-4冰箱保存待检. 试剂由上海复星医学科技发展有限公司提供，操作严格按照试剂盒说明书进行. 扩增产物经含EB染色剂的琼脂糖凝胶电泳，将凝胶置于紫外检测分析仪上观察，如在450 nm处出现橙黄色条带，则标本中有Uu核酸存在，如在225 nm处出现橙黄色条带，则标本中有Ct核酸存在. 检测结果见Fig 1. 用蛋白芯片(南京大渊生物医学试剂有限责任公司)方法检测两组血清中的Uu和Ct IgG抗体. 此蛋白芯片是渗滤式免疫反应芯片，使用间接法原理，胶体金标记. 可分型检测，多项同检. 以微孔滤膜为载体，利用微阵列技术将纯化的UuI, II群及CtLGV, CtBT群特异性蛋白固相于同一膜片上，并利用微孔滤膜的渗滤、浓缩、凝集等，使病原抗体反应在固相膜上快速进行，再以免疫金作为标记物直接在膜上显色，显色后的芯片放入芯片识别仪，在专门软件支持下对不同点阵的灰度值进行分析，实现了对两种病原体的抗体进行同步检测. 4、资料统计分析： 采用SPSS统计软件11.5进行统计学分析，χ2检验. P0.05,认为差异有统计学意义. 5、可行性分析 2.1孕妇与不孕症妇女宫颈分泌物Uu和Ct DNA检测情况将不孕症患者组设为第一组，例有文献报道，PCR检测法检测Ct灵敏度及特异性可达94％～100％，可作为临床检测的实用方法，尤其适用于Ct感染的早期诊断和无症状携带者的检查. 蛋白芯片法目前正开始应用于临床，蛋白芯片法是一种检测Uu和Ct的新方法，具有快速、简便、经济等优点，但其准确率稍低于PCR检测法. 我们采用PCR检测法和蛋白芯片法同时检测，可提高检测数为124例，孕妇组为第二组，例数为534例. 两组患者采用PCR方法检测Uu和Ct DNA不孕症患者Ct感染率显著高于孕妇组（P0.05）. 不孕症患者与孕妇Uu的感染率无统计学差异，均在33%左右. 两组Uu和Ct感染的总阳性率无统计学差异2.孕妇与不孕症妇女蛋白芯片法检测两组血清中的Uu，Ct IgG抗体情况同样将不孕症患者组设为第一组，孕妇组为第二组. 两组患者采用蛋白芯片法检测两组血清中的Uu和不孕症患者与孕妇染率无统计学差异。 6、研究成果 　　Uu和Ct感染是不孕症的重要因素. 女性感染支原体可导致生殖道炎症，使黏膜细胞坏死，输卵管纤毛运动停滞，引起不孕［1］. 不孕症妇女Uu和Ct感染的阳性率,各地报道不一, Uu感染率为27.2%～47.1%, Ct感染率为23.8%～44.1% ［2-4］. 本研究中，不孕症妇女Uu感染率为33.06%～37.10%，与各地报道一致，但Ct感染率在10％以下，显著低于前述研究，可能有地域差异. 不孕症患者Uu和Ct感染的阳性率明显高于正常未怀孕妇女. 孕妇Uu感染率可高达40%～80%. Ct感染率国内报道为1%～34%，国外报道为