山羊CD4分子在精子转染外源DNA中功能研究.pdfVIP

细胞工程与转基因 山羊CD4分子在精子转染外源DNA中的功能研究 王岭斌，于明举，范景胜，穆飙，谢畅，赵永聚 西南大学动物科技学院，重庆北碚400716 关键词：山羊；精子；CD4分子；外源DNA 引言 精子转染外源DNA是受到严格调控的一种现象。由于其操作简便，成本较低等优点，目前已成功的在 小鼠、猪、兔、牛、羊等物种上获得了转基因动物，其中小鼠、猪、兔建立了表达外源基因的转基因品系。 但是，关于精子结合内化外源DNA的研究报道差异极大，甚至相互矛盾；其主要原因是内化转运机制不清楚， 这也是目前困扰精子介导转基因方法广泛运用的问题所在。CD4是目前发现的参与精予转运外源DNA的侯 选分子之一。目前已在CD4基因敲除小鼠上发现CD4可能参与了外源DNA的内化转运机制，但尚需在其他 物种上得到进一步实验支持。 材料方法 选择体况相近的大足黑山羊、乐至黑山羊公羊，共20只。假阴道法采集山羊精液，筛选精予活力精液的 细胞术检测CD4表达水平；将膜CD4特异性封闭后的精子转染外源DNA，免疫组化检测转染效率，研究CD4 13．O)软件对试验结果进行显著性及相关性 分子对精子结合、内化外源DNA效率的影响。用SPSS(Version 分析。 结果 。 成熟精子顶体后区及尾部的质膜上。精予转染外源DNA的结果显示：两个品种山羊精子结合DNA效率分别： 75．67+_14．18％。CD4封闭后的精子结合效率分别下降了12．84+_3．92％、7．31-+4．66％，内化效率分别下降了 化外源DNA的能力呈显著相关(r=-0．529，P0．05)。 讨论与结论 山羊精子膜上都有CD4分子的表达，且分布在精子顶体后区及尾部的质膜上。大足黑山羊精子的CD4 表达量极显著高于乐至黑山羊，且结合外源DNA能力显著高于乐至黑山羊，内化外源DNA能力极显著高于 乐至黑山羊。CD4封闭后精子结合、内化外源DNA效率显著降低。本研究证明：山羊CD4分子是影响精予 结合内化外源DNA的关键分子。 致谢 基金资助。感谢罗艳梅和赵从在样品采集及数据分析方面提供的帮助。 ·——191。～