中国荷斯坦牛MHC-DRB3-exon2PCR-SSCP多态性分析.pdfVIP

王学清1，王昆H ，李耕2， 孙东晓2，吴占军1，张峰1 1河北省农林科学院粮油作物研究所；河北省农林科学院奶牛研究中心；石家庄050031 2中国农业大学动物科技学院，北京100094 关键词：中国荷斯坦牛；MHC—DRB3：PCR—SSCP 引言 主要组织相容性复合体(MHC)是由紧密连锁、高度多态的基因位点所组成的染色体 上的一个区域，在机体的免疫应答调控和免疫识别过程中发挥着重要作用。因此MHC基因 成为动物抗病育种研究中一个重要的侯选基因。已有研究表明，MHC与疾病的抗性和易感 性以及动物的生产性能之间有非常密切的关系，但是目前还未得到一致的结果。本实验旨在 荷斯坦牛MHC的分子遗传学特性，进一步分析MHC基因多态性与奶牛主要生产性能之间 的关系。 材料方法 从北京西郊牛场采集中国荷斯坦牛不同家系的血样223份，ACD抗凝，．20。C保存。采 用常规酚．氯仿法提取基因组DNA，0．8％琼脂糖凝胶电泳检测。根据文献报道设计合成 下用10％非变性聚丙烯酰胺垂直板凝胶进行电泳，电泳17．24h后用硝酸银染色，照相并比 较分析结果。用sas9．1软件进行不同基因型不同性状最小二乘效应值及差异显著性检验。 结果 在223个个体中共分析得到10种等位基因，其中D等位基因的频率最高为0．2287，A 家系中均为优势基因型；HH型在94127家系中为优势基因型；DH型在94161家系中为优 势基因型；FG型在98391家系中为优势基因型。差异显著性分析表明，D等位基因对305 天产奶量和305天乳蛋白量有明显的负效应，ME基因型个体305天乳脂量显著低于其他个 体。 讨论 多态程度高而且多碱基突变是哺乳动物MHC基因的一个非常突出的特点，其编码的抗 原在免疫系统中发挥着重要的作用，目前国内、外学者对人类等的研究结果都已证明了这一 中国荷斯坦牛BoLA．DRB3*exon2区具有高度的多态性，但其中几种基因型只在单个个体检 测到，有待于扩大样本含量进行确证。另外发现不同的SSCP型具有明显的家系分布特异性， 各个家系也有自己的优势基因型。这种家系的优势基因型是否与不同家系对某种疾病的易感 性或高抗病性有关，还需进一步收集资料记录进行相关分析，以揭示BoLA．DRB3*exon2基 因与相关疾病关联的机制，为进一步推动中国荷斯坦牛的抗病育种奠定基础。 致谢 本研究受河北省自然科学基金项目．BoLA—DRB3基因近端调控区多态性及其调控机 态性研究(2009)，河北省农林科学院财政项目(2010055008)资助。