ORMA40载体介导生存素基因转染嗅神经鞘细胞.pdfVIP

维普资讯 昆 明 医学 院 学 报 2007。(6)：64—67 CN 53—1O49／R JournalofKunmlngMedicalCollege ORMA40载体介导生存素基因转染嗅神经鞘细胞 朱兴宝 一，林 勇 ，郭西 良 ，孟庆姝 ，王廷华 ，范泉水 ) (1)成都军区昆明总医院神经外科；2)成都军区疾病预防控制中心博士后科研工作站，云 南 昆明650032；3) 昆明医学院神经科学研究所，云南 昆明 650031) [摘要]目的 评价以纳米粒子ORMA40为载体介导生存素基因转染嗅神经鞘细胞 的效率、方法 合成 ORMA40；扩增、分离并纯化人类生存素基因的质粒ps和mS；制备ORMA40一pS／mS复合体pSO和 mSO；分 离、培养、纯化并鉴定嗅神经鞘细胞 (olfactorynerveensheathingcells，ONECs)；分别采用pS、pSO、mS或 mSO转染 ONECs，结果 电镜表明，水相ORMA40分散好 、平均直径为20nm；电泳表明，mSOC和pSOC不 被 DNase1消化；免疫细胞染色表明，mS、pSO和 mSO可转染50％以上的ONECs；统计分析表明，pSO和 mSO转染 ONECs的效率 比ps转染者高 (P0．01)、与 ms转染者相 当 (P0，05)，结论 以纳米粒子 ORMA40为载体可高效地介导生存素基因转染 ONECs， [关键词]纳米粒子；生存素；嗅神经鞘细胞 [中图分类号]R651[文章标识码]A [文章编号]1003—4706 (2007)06—0o64一o4 NanoparticleORMA40asaVectorM ediatesSurvivinGene DeliverytoOlfactory NerveEnsheathingCells ZHUXing—bao，LINYong ，GUOXi—liang ，MENGQing—shu ，WANGTing—hua ，FAN Quan—shui ()NeurosugeryDept．KunmingGeneralHospitalofChengduMilitaryCommand；2)PostdoctoralReserach Stmion，DiseasePreventionandcontrolCenterofChengduMilitrayCommand，Kunming 650032；3) InstituteofNeuroscience，KunmingMedicalCollege，Kunming 650031，China) [Abstract]Objective ToexploretheeffectivenessofnanoparticleORMA40asavectorfordeliveryofsurvivingenetoolfactory nenreensheahtingcells(ONECs)，Methods ORMA40nanoparticles(0RMA40)wassynthezed，andplasmidsurvivin(pSnadmS) waspmpagated，isolatednadpurifyedtoofrmORMA40一survivincomplexes(pSOnadmSO)；ONECswasisolated，cultured，purifyed andidentifyedtotransfectONECswiht pS，mS，pSO ormSO，Results TrnasmissionelectronmicroscopyshowedhtatORMA40 werehi曲lymonodispersedinhteaqueoussolutionwihthteaveragesizeof20nm；agarosegelelectrophoresisshowedthatbohtmSO nadpSOwerefree