OEP、SDS与卵黄的相互作用时间及温度对犬冻融精子质量的影响.pdfVIP

维普资讯 第 46卷 第6期 复 旦 学报 (自然科学版) V01．46No．6 2007年 12月 JournalofFudanUniversity(NaturalScience) Dec．2007 文章编号：0427—7104(2007)060890—06 OEP、SDS与 _黄的相互作用时间及温度 对犬冻融精子质量的影响 李新红，高 超，赵 蕾 (上海交通大学 农业与生物学院，上海 201101) 摘 要：人工采取8只优质犬精液，以果糖一TS_柠檬酸所组成的稀释液为基础，分别于试验前0．5h和24h将 OEP，SDS和卵黄混合于基础稀释液中，并于 5℃冰箱、22℃两个温度条件下保存，用时离心选取上清液作为稀 释剂并制成细管冻精．利用流式细胞术和高倍显微镜对犬冻融精子活力、质膜完整率和顶体完整率等特性进行 测定，目的在于比较不同温度条件下OEP，SDS和卵黄相互作用时间的长短对犬冻融精子质量的影响，以探讨 OEP，SDS对冻融精子的保护作用机理．添加稀释液前24h混合OEP和卵黄有利于维持冻融过程中质膜完整率 (61．5％)和顶体完整率 (66．8％)，显著提高冻融精子的总活性比率 (20．2％)，对犬冻融精子的保护效果明显好 于相互作用0．5h实验组的保护效果 (P0．05)；OEP，SDS与卵黄相互作用时的温度对犬冻融精子质量无显著 影响(P0．05)，OEP对犬冻融精子的保护效果明显优于SDS．结果提示增加OEP，SDS与卵黄相互作用的时间 可以提高犬冻融精子的质量． 关键词：犬；冻融精子；OEP；SDS；卵黄 中圈分类号：S813 文献标识码：A 随着宠物饲养业的发展，引进优质犬种并利用冻精繁育已引起国内外广泛关注．研究表明，稀释液成 分 J、防冻液组成 J、冷冻及解冻程序 3等诸多因素影响犬冻融精子的质量，如导致冻融精子活力、质膜及顶 体完整率降低，犬的受孕率及产仔率低于 自然繁殖，所以要在实际生产中建立犬冻精的人工授精技术尚有许 多待解决的问题L4J．目前国内主要集中在冷冻稀释液 J、防冻液、冷冻程序及包装程序等方面的研究 J，以探 求有效提高犬冻融精子质量的最佳方案．1972年Grah砌 J等人首先报道了在精子稀释液中添加OrvusES Paste(氨基一钠一十二烷基硫酸脂，OEP)可以减少冻融过程对精子的损伤，近年来OEP的类似物ESP等物质均 广泛应用于冻融精子保护剂中，已取得较好的保护效果f8J．OEP，ESP(EquexSTMPaste)等物质中含有十二烷 基硫酸钠(6)复合物，是一类表面活性剂，对精子膜结构有保护、修补作用，能够提高冻融精子活力、存活率 及质膜完整率9．至今为止，OEP对冻融精子的保护机理尚不清楚，2002年 加J等人认为OEP通过分散卵 黄中的类脂形成细小乳脂颗粒体，使这些类脂物更易进入精子质膜，而不是直接作用于精子膜结构．假如 OF,P的保护作用是通过分散卵黄中的类脂来实现的，那么OEP与卵黄两者相互作用时间的长短及温度可能 是影响OEP作用效果的外在因素．采用OEP，SDS和卵黄相互作用时间的不同，结合流式细胞术分析OEP， S[6与卵黄不同处理方式对犬冻融精子的保护效果．比较不同温度条件下OEP与卵黄相互作用时间的长短 对犬冻融精子质量的影响，进一步探讨OEP，SDS对冻融精子的保护机理． 1 材料和方法 1．1 精液来源 试验所用精液分别采 自于本学院动物饲养场中苏格兰牧羊犬、笃宾犬、金毛犬及普通家养犬等犬种． 收稿 日期：2007—0730 基金项 目：上海交通大学青年基金资助项 目(A2122B)；上海交通大学 PRP资助项 目( 作者简介：李新红(1971一)，男，副教授 ，E—mail：lixinhong7172@yahoo．oom．cn． 维普资讯 第6期 李新红等：OEP、SDS与卵黄的相互作用时间及温