P53及其相关蛋白对X射线照射肝癌细胞周期的调节.pdfVIP

维普资讯 第 24卷 第4期 原 子 核 物 理 评 论 Vo1．24，No．4 2007年 12月 NuclearPhysicsReview Dec．，2007 文章编号：1007—4627(2007)04—0289—05 P53及其相关蛋 白对 X射线照射肝癌细胞周期的调节 刘 辉 ，张 红一，刘 兵 ，王小虎 ，郝冀芳 ，段 昕 ， (1中国科学院近代物理研究所，甘肃 兰州730000； 2武汉大学医学结构生物学研究中心，湖北 武汉 430071； 3甘肃省肿瘤医院，甘肃 兰州 730050) 摘 要：X射线照射人肝癌细胞HepG2，照射后细胞存活随照射剂量增大明显下降。流式细胞术分 析，不同剂量组照射后24h均发生G，期阻滞。照射后不同时间组的细胞周期分布也有不同，照射 后 12h，有显著的s期延迟。WesternBlot显示照射后24hP53，MDM2，P21蛋 白表达上升，并有时 间效应：P53在照射后24h之内始终维持较高表达，MDM2和P21分别在照射后6和 12h的表达 最高 x射线照射通过影响P53及其相关蛋 白的表达影响细胞周期。 关 键 词：X射线照射 ；HepG2；细胞周期；P53；P53相关蛋 白 中图分类号 ：Q257；R730．55 文献标识码 ：A 1 引言 转录激活功能，形成一个负反馈环，限制G期阻滞 的时间，使DNA损伤修复后的细胞再进入细胞周 电离辐射引起 DNA损伤后，P53蛋 白表达上 期。目前人们已经认识到P53及其相关蛋 白在调节 升，细胞启动 DNA修复过程，同时伴随P53通路 细胞周期过程中的重要作用，但对调节过程中很多 调节的细胞周期紊乱，即G 期、S期和G 期的阻 具体环节的了解还不深入，本文研究了x射线照射 滞或延迟 。G 期阻滞过程中伴随着碱基切除修 对人肝癌细胞 HepG2细胞周期的影响以及 P53和 复、核苷酸切除修复和非同源末端连接，S期和 G 相关蛋 白表达的时间效应，从而进一步探讨辐射引 期阻滞过程中伴随有借助同源染色体的同源重组修 起细胞周期紊乱的机制。 复 。辐射引起的细胞周期 G期阻滞比G期阻滞 更普遍 ¨，夏景光等研究表明4种不同的肿瘤细胞 2 材料与方法 在受到3Gy 射线辐射后，都有明显的G期阻滞 2．1 细胞及其培养 发生 j。实验表明，DNA错配修复体系能调节 G／ M检查点 ，而G，／M期的阻滞有不依赖P53的途 人肝癌细胞 (HepG2细胞系，p53野生型)由中 径，也有依赖于P53的途径 。辐射引起的G。期 国科学院近代物理研究所医学物理组细胞实验室冻 阻滞依赖于野生型p53基因(wtp53)的调节，刘兵 存。复苏后细胞培养于含 10％胎牛血清的高糖 等用辐射诱导的P53腺病毒重组体转染直肠癌细 DMEM(Dulbeeeo’sModifiedEagle’sMedium)培养 胞，发现转染P53叮引起细胞发生 S期，G／G。期， 基，5％CO，，37