ADMET工程细胞株的构建——调研报告.docVIP

 目 录 1 药物ADME/T研究的内容 1 1.1 药物ADME/T性质研究的内容 1 1.2 药物ADME/T性质研究的必要性 1 2 药物ADME/T性质体外研究常用的细胞模型 5 2.1 Caco-2细胞模型 6 2.1.1 Caco-2细胞模型的基本特点 6 2.1.2 Caco-2单层细胞模型的建立 6 2.1.3 Caco-2细胞模型的评价 7 2.1.4 Caco-2细胞模型在口服药物吸收及机制研究方面的应用 8 2.1.5 Caco-2细胞模型在药物吸收机制研究方面的优缺点 9 2.2 MDCK细胞模型 9 2.2.1 MDCK细胞模型的基本特点 9 2.2.2 MDCK单层细胞模型的建立 11 2.2.3 MDCK单层细胞模型的评价 11 2.2.4 MDCK细胞模型在药物研究中的应用 12 2.3 LLC-PK1细胞模型的基本特点及其应用 13 2.4 ADME/T细胞模型在我国中药发展中具有重要的作用 14 3 药物转运体研究技术及其对药物研发的贡献 15 3.1 药物转运体的概念、分类、功能及组织分布 16 3.2 药物转运体与药物相互作用研究的指导原则 18 4 高效表达药物转运体的转基因细胞模型 20 4.1 药物转运体细胞模型的构建方案 21 4.2细胞模型转运体稳定表达的验证方法 21 4.3 MDCK-MDR1细胞模型的构建及评价 23 4.3.1 MDCK-MDR1细胞株的构建 23 4.3.2 MDCK-MDR1细胞株的生物学特征及功能性检测 23 4.3.3 MDCK-MDR1细胞株建立的意义及应用 25 4.4 LLC-PK1-BCRP细胞模型的构建及其评价 27 4.4.1 LLC-PK1-BCRP细胞株的构建 27 4.4.2 LLC-PK1-BCRP细胞株的生物学特征及功能性检测 27 4.4.3 LLC-PK1-BCRP细胞株建立的意义及应用 29 4.5 稳定表达人有机阴、阳离子转运体和有机阴离子转运肽的HEK293细胞株构建及评价 30 4.5.1 HEK293-OATP1B1细胞株的构建 30 4.5.2 HEK293-OATP1B1细胞株的生物学特征及功能性检测 31 4.6 Bcap37-MDR1细胞模型的构建及其评价 31 4.6.1 Bcap37-MDR1细胞模型的构建 31 4.6.2 Bcap37-MDR1细胞株的生物学特征及功能性检测 32 4.7 多种转运体蛋白共表达的转基因细胞模型 33 5 项目展望（个人看法） 34 图 目 录 图1 药物在体内的转运过程 1 图2 一个新药从研究开发到成功上市的基本过程 2 图3 药物研发历程中导致失败的原因分析 3 图4 ADME模型在药物研发过程中角色的转变 3 图5 ADME/T模型在药物研发中的价值贡献 5 图6 Caco-2细胞单层模型 7 图7 中药及中药复方体外ADME/T性质研究的一般思路 15 图8 SCI收录的关于转运体在药动学/药物相互作用方面的文章数量年年递增 16 图9 机体主要器官药物转运体的功能及分布 16 图10 药物转运体细胞模型构建的一般策略 21 图11 LLC-PK1-BCRP单克隆细胞的活性鉴定——Hoechst 33342染色法 28 表 目 录 表1 MDCK细胞与Caco-2细胞的比较 11 表2 ABC转运体家族 17 表3 SLC转运体家族 18 表4 药物相互作用研究相关的转运体 19  药物ADME/T研究的概述 药物ADME/T性质研究的内容 药物动力学 织药物浓度随时间变化规律的一门学科（图1所示）/T是近几年发展起 来的、全新的、在细胞水平上早期进行药物的活性与吸收（Absorption）、分布 （Distribution）、代谢（Metabolism）、清除（Excretion）及毒性（Toxicology） 实验的新型新药研究模式，简称为ADME/T实验系统。ADME/T药物动力学是当 代药物设计和药物筛选中十分重要的方法。 行一系列探索药物ADME性质及其机理的研究工作。药物的动力学性质在药物开 发和应用中占据着非常重要的地位。 药物ADME/T性质研究的必要性 在新药研发和使用过程中，化合物的体内过程（吸收、分布、代谢、排泄）和毒性（ADME/T）是其成药性的重要指标。在药物设计及新药开发早期就要开展药物代谢研究，有利于提高新药研发的成功率，降低新药开发的成本，有助于获得安全、有效的治疗药物。因此，化合物ADME/T性质在创新药物转化研究中发挥重要作用并贯穿了整个研发过程，包括应用药物ADME性质设计和优化药物结构；筛选药物ADME活性；体外评价药物ADME性质；应用整体动物体内评价药物ADME性质；预测由药物代谢引起的毒性；指导临床药