乳腺生物反应器特异调控序列的构建.pdfVIP

No．3 ·275· 中国生物制品学杂志2006年5月第19卷第3期Chin】8iolo垂calsMay2006，V01．19 【基础研究】 乳腺生物反应器特异调控序列的构建 蒋小玲张红梅徐六姝王火生 乐晓华李丽雄周伯平 【摘要】 目的构建可以指导外源基因在动物乳腺组织特异表达的调控序列——牛俚一S1酪蛋白基因调控序列。方法 提取新生小牛肝组织的DNA，应用PCR分段扩增牛仪一S1酪蛋白基因调控序列，经琼脂糖凝胶电泳鉴定后测序，再将各基因片 段连接成完整的序列。并将外源基因ALB亚克隆入该调控序列内，转染C127细胞，经免疫组化法检测其表达情况。结果 乳腺生物反应器特异调控序列——牛q—S1酪蛋白基因调控序列，包括其1．8kb上游序列、第一外显子、第一内含子、包含翻 译起始位点的第二外显子和部分第二内含子，及其最后一个内含子的大部分、最后一个不翻译的外显子(含多聚A信号)及侧 翼区全长5．8kb。位于该调控序列内的ALB高效表达。结论成功构建乳腺生物反应器特异调控序列——牛d—S1酪蛋白 基因调