S区和C区小干扰RNA在小鼠体内抗乙型肝炎病毒的作用.pdfVIP

维普资讯 第35卷第4期 广 州 医学 院学 报 V01．35No．4 2007年 8月 ACADEMICJOURNALOFGUANGZHOUMEDICALCOUJEGE Aug．2O07 · 论 著 · S区和 C区小干扰 RNA在小鼠体 内抗乙型肝炎病毒的 作用 应若素 范学工 唐小平 朱 才 李 宁 (广州市第八人 民医院感染病科，广州 510060；中南大学湘雅医院感染病科，长沙410008； 景德镇市第一人民医院感染病科，景德镇 333000) 摘要 目的：以乙型肝炎病毒 (HBV)S区和c区为靶住，观察小干扰 RNA(siRNA)在小鼠体 内抗 HBV的 作用。方法：以流体动力学法建立HBV感染的动物模型，将 peDNA3．1一HBV和细胞体外实验证明有效的S区 和c区siRNA尾静脉注射BALB／c小鼠，用时间分辨免疫荧光分析法(IFMA)检测小鼠血清中乙型肝炎表面抗 原 (HBsAg)，用定量PCR法(FQ—PCR)检测血清HBVDNA，用RT-PCR法检测HBVS．mRNA和C—mRNA。结果： 在小鼠体内，和无关 siRNA相比，s区和c区siRNA均能有效抑制血清中HBsAg的分泌 (第 l天的抑制率分别 为96％和9o％)，降低HBVDNA的滴度 (第 l天分别减少47％和7l％)，HBVS．mRNA和C—mRNA的条带灰度 明显减少，干扰效果至少持续3d。结论 ：在小鼠体 内靶向HBVS区和c区的siRNA均能有效特异抑制HBV。 关键词 小干扰RNA；乙型肝炎病毒；动力学；动物模型 中图分类号 R512．6 2 文献标识码：A 文章编号：1008—1836(2007)04—0005—40 InhibitionofHepatitisB VirusReplication and Expression bySmallInterfering RNA inM iceTargetingSGeneRegionand C GeneRegion YINGRuo一$1Z’FAN Xue-gong2 TangXiao-ping ，ZHU Cai，LINing2 ， (DepartmentofInfectionsDiseases，TheNo．8MunicipalPeople’sHospital，Guangzhou510060；Departmentof Infectionsl~ileases，XiangyaHospital，CentralSouthUniversity，Changsha410008；DepartmentofInfectionsDiseases， FirstMunicipalPeoplesHospital，Jingdezhen333000) Abstract Objective：ToevaluatetheinhibitoryeffectofthesmallinterferingRNA (siRNA)onhepatitisBvirus (HBV)inmicewhichtargetsHBVSandCgeneregions．Methods：AnimalmodelofHBV infectionWas developed hydrodynamicallybyinjectingpcDNA3．1一HBVandsiRNAthroughthecaudalveinofBALB／c．HBsAgWas naalyzed bytime—resolvedimmunofluorometricassay，HBVDNAbyfluorogenicqunatitativePCR (FQ—PCR)，andHBV S- mRNA nadC—mRNAbysemi-qunatitativeRT—PCR．Results：Inmice，hteS-siRNAna dC-siRNAwereshowntoinhibit 96％ nad90％ ofHBsAgproduction，nadred