复方水蛭素对小鼠移植瘤组织中p53、Ki-67及VEGF表达的影响.pdfVIP

山东医药2008年第48卷箍43期 复方水蛭素对小 鼠移植瘤组织中p53、 Ki。67及 VEGF表达 的影响 张 博 。王晓敏 。任青华 ，刘 莹。 (1山东省医学科学院，山东济南250o62；2山东大学第二医院； 3山东省立医院) [摘要] 建立小鼠移植瘤模型(均接种s18O瘤细胞)。取4O只实验 鼠随机分为四组 ，各 10只。模型对照组 给予生理盐水，阳性对照组给予环磷酰胺，实验组分别给予 1．3、2．6g／kg的复方水蛭素(连续用药 l4d)。比较各 组肿瘤生长情况，并计算抑瘤率 ，同时取肿瘤组织用免疫组化法检测p53、 一67及血管内皮生长因子 (VEGF)的表 达。实验组中大小剂量组抑瘤率分别为57．89％和53．68％，其肿瘤组织中p53、Ki—67阳性细胞百分数均低于肿瘤 模型对照组(PO．O5)，同时其 VEGF表达降低 (尸O．O5)。认为复方水蛭素对小鼠移植瘤具有显著的抑制作用 ， 使肿瘤组织 p53、．67以及 VEGF表达降低。 [关键词】 水蛭素；s18O细胞 ；p53蛋白；l(i7蛋白；血管内皮生长因子 [中图分类号] R285．5 [文献标识码] B [文章编号] 1O02 66x(2008)43JDo29一D2 近年来，国内外研究已证实许多中药可用于肿 剥离的肿瘤组织固定于 lO％福尔马林溶液中，石蜡 瘤的治疗。2o06年3月一2o08年6月，我们观察了 包埋。连续4 m切片，分别行HE及免疫组化。每 复方水蛭素对小鼠移植瘤的生长抑制作用及瘤组织 例标本均用PBs代替一抗作阴性对照。p53和Ki一 中p53、 -l57及血管 内皮生长因子 (VEGF)表达 的 67均定位于细胞核，呈棕褐色为阳性。在高倍镜下 影响，以探讨复方水蛭素的抑瘤作用及机制。 随机观察5个视野，每个视野计数20o个细胞，计算 1 材料与方法 阳性细胞 占肿瘤细胞总数的百分数：细胞核内未见 1．1 材料 昆明种小鼠20～25g，雄性；s18O肉瘤 染色颗粒为阴性(一)；阳性细胞 l1％～3O％为弱阳 细胞株；环磷酰胺；复方水蛭素；抗 VEGF抗体、抗 性(+)；阳性细胞 3l％一5O％为阳性 (++)；阳性 p53抗体、抗Ki_；《7抗体。 细胞 5O％为强阳性 (+++)。VGEF定位于细胞 1．2 方法 质，判断标准同上。 1．2．1 小鼠移植瘤模型的建立及分组 无菌条件 1．2．3 统计学方法 采用 SPSs12．O统计软件。数 下取 Sl8O瘤细胞悬液，小 鼠腹部消毒后腹腔注入 据比较用 检验。P≤0．05为差异有统计学意义。 0．3ml悬液，7一l0d，腹部消毒后无菌针管抽取腹 2 结果 水 3～5ml，配成癌细胞浓度约为 1×10个／ml的细 2．1 复方水蛭素对 S180小 鼠局部肿瘤生长的影响 胞悬液。于小 鼠左前腋下接种 S180瘤液 O．2ml／， 模型对照组、阳性对照组、复方水蛭素大、小剂量组 只。取40只小鼠，随机分四组各 10只。即模型对 瘤重分别为(O．95±0．32)、(O．3l±0．o6)、(0．4o± 照组、阳性对照组、复方水蛭素大剂量组、复方水蛭 O．17)、(O．44±O．19)g，后三组瘤重均低于模型对照 素小剂量组。 组。复方水蛭素大剂量组抑瘤率为57．89％，小剂量 腋下无菌接种 S18O瘤细胞24h后，模型对照 组为53．68％，阳性对照组的抑瘤率为67．36％，虽然 组给予生理盐水，阳性对照组给予环磷酰胺0．O2g／ 阳性对照组比复方水蛭素大小剂量组的抑瘤率要高 只，复方水蛭素大剂量组给予复方水蛭素2．6 kg， (PO．01)，但在给药的第6天，小鼠出现掉毛、蜷缩、 复方水蛭素小剂量组给予复方水蛭素 1．3g／kg，每 纳食减少、委靡不振的现象，复方