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·532· 促红细胞生成素及其检测技术研究进展 邢延一张力思 国家体育总局反兴奋剂中心(北京100029) EPo是促红细胞生成素(Erythropoietin)的英文简称，祖细胞，使其增殖、分化、成熟为红细胞并释放，以维持血液 是第一个被发现并应用于临床的造血生长因子。其体外 中红细胞数量和血红蛋白含量。在缺氧条件下体内EPO 浓度在0．05～O．1U／ml时即具有剂量依赖效应，是一种强数量会增加，同时红细胞和血红蛋白也会相应地增加。 有力的造血因子叫。1985年，人们运用重组技术[23表达了 临床上EPO不仅用于治疗肾性贫血，而且已经被应 重组人红细胞生成索(rHuEPO)。随后的几年里，为了提用于各种慢性贫血、恶性肿瘤、免疫疾病及AIDS等伴随的 高运动成绩人们很快将其应用到竞技体育中。然而，大剂 贫血的治疗n]。尽管输血由于起效快、价格低等有利因素 量使用rHuEPO给运动员的健康带来了严重损害。自从在临床治疗中被广泛应用，但是它也存在诸多潜在危险， 国际奥委会将其列入禁用名单以来，许多科学家就开始不 如感染、输血反应，严重时甚至引起死亡。而注射EPO则 断研究检测方法。从采用间接法测定5个血液学的参数 能有效地避免这些输血并发症。 指标后代入公式计算，结果再与标准值对照进行判定口]， 2 重组EPO(rHuEPO) 到直接运用电泳方法区分外源性和内源性EPO，该物质的 由于EPO在体内的作用巨大而天然来源却十分有限 检测方法日趋成熟。但是，目前应用于常规的检测方法仍 (主要从贫血患者的尿中提取)，人们便开始利用基因重组 存在很大的改善空间，如提高检测效率、缩短检测时间等。 本文主要就EPO及其检测技术最新研究进展作一简介。 的分子，它由不同的糖化体构成，各种糖化体的区别主要 1 EPO的性质及作用 表现在糖基在整个分子中所占的比例不同，而这个比例也 1．1产生及代谢 正是rHuEPO是否具有生物活性的关键。 胚胎时期EPO由肝脏产生，在从9个月胎儿至4个月 从静脉注入血液的rHuEPO与体内自然生成的EPO 婴儿发育过程中，肝脏的功能逐步由肾脏代替，成年后 的作用极为相似，它一方面能够刺激骨髓造血功能，及时 90％EPO由肾脏产生。EPO经肝脏代谢后，只有极少量有效地增加红细胞的数量；另一方面能够增强机体对氧的 从尿液排出。 结合、运输和供应能力，有利于在高强度竞技时改善缺氧 1．2分泌与调节 状态，促进肌肉中氧生成，使肌肉更有力、工作时间更长， 健康成人血浆中EPO水平为10～20U／L，晚上8点 从而增强运动能力。长期使用rHuEPO，对运动员来说， 可能会带来一时的荣誉，但给其健康带来的却是永久的危 分泌量最大，可达基础量的160％。同时EPO的产生也受 机体内血氧含量及动脉氧分压的影响。在失血、低氧的刺 害。超大剂量使用rHuEPO可导致红细胞和血红蛋白含 激下EPO含量迅速上升，如急性失血达25ml时血浆EPO量过度增加，当血红蛋白含量超过55％时，血液粘滞度就 即上升，失血250ml时血浆EPO量可增加5倍；慢性失血会增高，同时血流也会变慢。加上外界因素如运动脱水、 使血细胞比容降至0．20时可使EPO含量增加100倍以环境压力和不合理医务监督等，当血红蛋白含量升高至 上。临床上也将此作为临床用药剂量的依据n1。 65％甚至70％以上时，血流速度过慢，引起工作肌缺氧，有 1．3 EP0的结构特点 可能导致静脉微血栓形成，从而引起肺栓塞、中风和死亡。 EPO属肽类激素，分子量约34000D。主要由多肽链和目前市场销售的促红细胞生成索制剂中，虽然厂家及 糖基两大部分构成。多肽链部分由165个氨基酸单链性 产品名称不同(如益比奥、生血素、利血宝等)，但其结构、 蛋白组成；糖部分由4条N一乙酰基乳糖胺连结的寡糖链组 功能及代谢规律均非常相似。