超分子DNA%2f量子点纳米线功能化的聚苯乙烯微球探针在DNA可视化检测上及应用.pdfVIP

超分子DNA/量子点纳米线功能化的聚苯乙烯微球探针在DNA 可视化检测上的应用 钟华，张茹敏，张书圣* 青岛科技大学化学与分子工程学院，生态化工国家重点实验室培育基地，山东青 岛 266042 *联系人：Tel Fax: 0532 E-mail: shushzhang@126.com 本文介绍了一种新颖的信号放大型可视化荧光探针，并演示了这种探针在可 视化DNA 杂交检测以及癌细胞荧光染色成像中的应用。该探针的设计原理如示 意图1 所示，探针以聚苯乙烯纳米微球为载体核芯共价结合DNA 连接链，并以 该连接链为基础和起始端进行线性DNA 模块化自组装，线性生长一定时间后加 入生长终止DNA 链使反应终止，该终止链同时也是探针的识别部分依靠它来识 别待分析目标其位置暴露在最外端因此它对目标的识别结合不受由包裹层厚度 带来的位阻因素的影响。该设计在保证不影向探针识别目标的效率的同时极大地 提高了探针的信号放大能力。 图1. 探针设计原理及探针扫描电镜照片，探针尺寸为400-500 纳米。 本文采用三明治夹心法来进行靶DNA 的杂交可视化检测，原理如图1 左下 角所示。在玻璃基底固定捕获DNA 并捕获样品溶液中的靶DNA ，然后直接使用 荧光显微成像来观测该新型探针在玻璃基底上与被捕获的靶DNA 之间的杂交情 况，当靶DNA 浓度在1 fM 时观察到的结果如图2a 所示。另外本文还将终止DNA 链的暴露端设计成Ramos 细胞（一种人类B 淋巴瘤癌细胞）的特异性适体，展 示了该探针在癌细胞特异性荧光染色及成像观察中的运用。由于该探针强大的荧 光量子点负载能力，被其染色的靶细胞（如图2c 所示）与用常规量子点探针染 色的靶细胞（如图2b 所示）相比具备更强的荧光亮度。总之，本文利用该新型 探针实现了高清晰的靶DNA 可视化荧光成像检测，另外只需更换终止DNA 链 就能方便地实现探针的多用途，本文即展示了其在靶细胞荧光染色及成像方面的 应用。 图2. 探针的应用。（a ）玻璃基底上靶DNA 的直接荧光成像检测。（b ）普通量子点探针染 色的Ramos 细胞照片。（c ）本文探针染色的Ramos 细胞照片。 Supramolecular DNA-Quantum Dot Nanowires Functionalized Polystyrene Microbead Probe for Direct Fluorescent Observation of DNA Hybridization * Hua Zhong, Rumin Zhang, Shusheng Zhang State Key Laboratory Base of Eco-chemical Engineering，College of Chemistry and Molecular Engineering ，Qingdao University of Science and Technology，Qingdao 266042，P.R.China. Abstract: A high-intensity polystyrene microbead probe that is functionalized with supramolecular DNA-CdTe quantum dot (QD) nanowires is developed for direct fluorescence microscopy imaging of DNA hybridization event. The supramolecular DNA-CdTe QD nanowires capable of loading a large number of CdTe QDs are formed on the surface of polystyrene