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胚胎分割 胚胎分割的基本操作 嵌合体 利用胚胎工程的方法,将不同品种甚至不同种的受精卵或早期胚胎镶嵌在一起,体外培养至囊胚,再将其移植到一个“代孕妈妈”体内,最终培育出具有不同遗传性状的完整个体,称为嵌合体。 嵌合体 干细胞 细胞全能性是指细胞经分裂和分化后仍具有形成完整有机体的潜能或特性。 动物和人体内保留的具有自我更新和分化发育潜能的原始细胞称为干细胞。这些细胞可通过分裂维持自身细胞的特性和大小,又可进一步分化为各种组织细胞。 干细胞工程 是指在体外对干细胞进行操作,包括体外增殖、定向诱导、分化、基因修饰和组织形成等,最终将干细胞培养成人们所需要的各种细胞、组织甚至器官。 造血干细胞的来源 [资料1]人体造血干细胞的80%以上储存在骨髓中,所以人们把早期的造血干细胞移植叫做骨髓移植。从正常人体中抽取一定量的骨髓,对人体不会有任何伤害,骨髓中的造血干细胞会很快地通过自我更新而恢复到原来状态。 [资料2]从外周血中分离造血干细胞的方法是:为捐献者注射一种细胞因子,如粒细胞刺激因子,诱使干细胞从骨髓迁移到外周血中。然后,在捐献者静脉中插入导管,使血液经过专门的分选系统,选出干细胞,将其他血细胞和血浆返回捐献者体内 [资料3]通常脐带和胎盘在胎儿分娩后就被抛弃。1988年,一位患有范克尼贫血病的儿童,首次接受脐带血移植,并获得了成功,这使医务工作者认识到了脐带血的重要价值。 胚胎干细胞(Embryonic Stem cell, ES细胞) 胚胎干细胞分离途径 胚胎干细胞的定向诱导分化 [实验1]在小鼠胚胎干细胞培养液中加入骨髓基质细胞和造血生长因子,培养一段时间后,胚胎干细胞就可以分化为早期的造血干细胞。 [实验2]撤去小鼠胚胎干细胞培养液中的分化抑制因子,2-5d后胚胎干细胞就会自发形成细胞团。将该细胞团加入到含有造血生长因子和红细胞生成素的培养液中,可以生成红系造血干细胞。 [实验3]撤去小鼠胚胎干细胞培养液中的分化抑制因子,2-5d后加入分化诱导剂地塞米松,2-3d更换一次培养液,50d后,小鼠胚胎干细胞发育成了软骨细胞。 干细胞应用 细胞替代 治疗角膜病、糖尿病、帕金森病 组织替代 治疗如皮肤、软组织、骨骼等组织病变 器官替代 无排斥反应的器官移植 培育人造组织器官 干细胞应用 干细胞培植眼角膜进行眼角膜移植修补手术 干细胞应用 干细胞培植心肌细胞治疗原发性心脏病 干细胞应用 骨髓干细胞可以自行转移到人脑,并可以转变为功能齐全的脑细胞治疗脑损伤、老年痴呆症以及帕金森氏综合症 * 优势:可成倍增加胚胎数量,可以快速繁殖良种畜。 采用机械方法将早期胚胎切割成2等份,4等份或8等份等,经移植获得同卵双胎或多胎的技术。 胚胎分割 特点: 后代具有相同的遗传物质,克隆 选择的胚胎: 发育良好的,形态正常的桑椹胚或囊胚 使用的主要仪器: 实体显微镜、显微操作仪、切割刀、切割针 注意: 将内细胞团均等分裂 选择良好的桑椹胚或囊胚移入培养皿中,用分割针或分割刀片将其切开,吸出其中的半个胚胎注入透明带中或直接移植给受体。 注意:将内细胞团均等分割 受精卵 分裂 早期胚胎 胚胎分割基本过程 代孕母牛 植入 植入 分割 由胚胎干细胞(ESC)制造嵌合鼠 应用: 1、研究动物胚胎发育过程中的一系列现象和问题,如早期胚胎的全能型、细胞分化的机理等。 2、建立实验动物遗传病的模型,研究治疗方案和筛选药物。 3、在家畜改良方面,把亲代动物的优良性状集中表现出来,从而形成具有高度杂种优势的杂合个体。 干细胞 分化能力 全能干细胞 多能干细胞 专能干细胞 具有形成机体的任何组织或器官直至形成完整个体的潜能 如受精卵、胚胎干细胞 干细胞分类 具有分化成多种组织的潜能,但不能发育成完整的个体 如造血干细胞可以分化出12种血细胞 只能分化成某一类型的细胞 如神经干细胞只能分化成各种神经细胞 造血干细胞的分化 干细胞分类 干细胞 来源 胚胎干细胞 成体干细胞 由早期胚胎或原始性腺中分离出来的一类细胞 来源于机体组织器官中的未分化细胞。 造血干细胞 神经干细胞 肝脏干细胞 1、造血干细胞的来源 2、造血干细胞移植的意义 造血干细胞主要来自骨髓、动员后的外周血和脐带血。 造血干细胞移植已经成为临床治疗血液系统疾病、遗传性血液病、顽固性自身免疫性疾病、严重免疫缺陷疾病以及癌症化学治疗与放射性治疗后免疫力低下等的有效手段。 思考与讨论 3、捐献适量的造血干细胞,为什么不会伤害捐献者的身体健康? 人体内的造血干细胞具有很强的再生能力。正常情况下,人体各种细胞每天在不断的进行新陈代谢,进行着生成、衰老、死亡的循环往复,失血或捐献造血干细胞后,可刺激骨髓加速造血,1-2周内,血液中的各种血细胞恢复到原来水平
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